miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达及其对PANC-1生物学功能的影响

摘要

目的：研究人miRNA-10b（Has-microRNA-10b，微小RNA-10b）在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达情况及其对胰腺癌细胞系PANC-1生物学功能的影响。
　　方法：采用实时荧光定量PCR检测miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达情况。通过化学合成成熟型人miRNA-10b模拟体，瞬时转染至PANC-1细胞中，实时荧光定量 PCR检测进行鉴定，检测 miRNA-10b的表达量。采用 MTT法检测miRNA-10b对PANC-1细胞增殖的影响，流式细胞仪检测对PANC-1细胞凋亡的影响， Transwell小室检测对PANC-1细胞的侵袭功能的影响，细胞划痕实验检测对PANC-1细胞迁移功能的影响，以探讨表达上调的miRNA-10b对胰腺癌细胞系PANC-1所起的生物学作用。
　　结果：实时荧光定量 PCR显示miRNA-10b在 PANC-1中相对表达量为（3.606±0.423），（P<0.01）。瞬时转染 miRNA-10b至PANC-1后，miRNA-10b转染组中miRNA-10b的表达量为空白对照组（4.392±0.176）倍，（P<0.01），阴性对照组为空白对照组（1.175±0.110）倍，（P>0.05）。MTT法检测转染后24h、48h、72h和96h时间点三组细胞的增值活性无明显差别（P>0.05）。流式细胞仪检测转染后miRNA-10b转染组凋亡率为（12.31±3.10）%，阴性对照组和空白对照组细胞凋亡率分别为（13.76±3.13）%、（16.28±4.19）%，（P>0.05）。Transwell小室侵袭实验结果显示miRNA-10b转染组PANC-1细胞穿膜数为（71.3±5.3）个，阴性对照组（30.1±3.4）个，空白对照组（29.2±5.2）个，miRNA-10b转染组穿膜细胞数明显多于对照组（P<0.01）。细胞划痕实验结果显示24h和48h后miRNA-10b转染组划痕间距逐渐缩小，而阴性对照和空白对照组两组划痕间距均无明显变化，且两组之间无明显差别。
　　结论：miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中明显高表达。化学合成的成熟型miRNA-10b可以转染入PANC-1细胞，能显著提高转染细胞中miRNA-10b的表达量，并有效发挥上调作用。转染miRNA-10b后对PANC-1细胞的体外侵袭和迁移能力有显著的促进作用，但对PANC-1细胞的增殖和早期凋亡无明显影响。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

目录

引 言

材料与方法

一、材料与试剂

二、实验器皿的处理

三、实验方法和步骤

四、统计学分析

结 果

一、实时荧光定量PCR显示miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中明显高表达

二、瞬时转染miRNA-10b，PANC-1细胞中miRNA-10b表达量明显上调

三、转染miRNA-10b后对PANC-1细胞生物学功能影响的检测

讨 论

结 论

参考文献

综 述

英文缩略词表

攻读学位期间公开发表的论文

致谢