组蛋白乙酰修饰对大鼠C6胶质瘤细胞中GCNF基因转录调控的研究

摘要

目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中GDNF基因高转录与其启动子区组蛋白乙酰化修饰的关系。
　　方法:应用RT-PCR、Real-timePCR和ChIP-PCR技术分别检测大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA的表达水平以及其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化程度;利用Real-timePCR和ChIP-PCR技术，检测不同浓度的组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)或去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA表达以及其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化的影响。
　　结果:较之正常星形胶质细胞，C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA的表达量极显著增高(p＜0.01)，并且其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化水平也显著升高(P＜0.05)。C6胶质瘤细胞经Curcumin处理24h后，GDNF基因mRNA的表达量随药物浓度的升高而降低，且100μM作用浓度时其表达量下降了74.17％(P＜0.001);相反，TSA处理后GDNF基因mRNA的表达量呈上升趋势，且200nM组其表达量约上升145.35％(P＜0.05)。同时，GDNF基因启动子Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化修饰水平对Curcumin或TSA的作用敏感，其乙酰化的变化趋势与转录水平变化趋势一致。
　　结论:在胶质瘤细胞中，GDNF基因启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9乙酰化水平显著增高;GDNF基因启动子Ⅱ区组蛋白H3K9高乙酰化可能是该基因异常高转录的原因之一。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1．材料

2．实验方法

结果

1．GDNF基因mRNA的表达水平

2．GDNF基因启动子区组蛋白乙酰化状态

3．Curcumin和TSA对C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA表达的影响

4．Curcumin和TSA对C6胶质瘤细胞中GDNF基因启动子区组蛋白乙酰化的影响

讨论

结论

参考文献

综述 HATs／HDACs抑制剂在胶质瘤中的研究进展

缩略词简表

攻读学位期间公开发表的论文

致谢