肾炎康复片改善阿霉素肾病模型肾组织炎症损伤的分子机制

摘要

[背景/目的]本文分为3部分。首先,我们综述了肾炎康复片治疗慢性肾脏病(Chronickidneydisease,CKD)的研究概况。肾炎康复片是中药复方制剂,具有健脾补肾、清化湿热、活血化瘀等功效。在肾脏病领域,国内有关肾炎康复片临床药效学的研究主要是针对慢性肾小球肾炎、肾病综合征、IgA肾病、糖尿病肾病、慢性肾功能不全等常见的原发和继发性CKD。其临床疗效主要表现在改善相应疾病的临床症状,减少蛋白尿、血尿,还可以改善肾功能。肾炎康复片治疗CKD的药理作用包括“抑制免疫反应、减轻炎症损伤、延缓肾纤维化、保护足细胞和肾小管上皮细胞”等。其次,我们总结了CKD肾组织炎症信号通路p38MAPK的调节机制及中药的干预作用。肾组织的炎症反应及其相关的组织损伤(如肾小球硬化和肾间质纤维化)是导致CKD进展至终末期肾病的重要因素。p38MAPK信号通路能够调控多种核转录因子的表达和生物活性,还可以影响多种下游炎症介质的合成,并参与炎症细胞的活化,在肾脏疾病炎症损伤中发挥着重要的作用。研究表明,某些单味中药及其提取物以及一些中药复方可以通过调节p38MAPK信号通路而影响肾组织内炎症反应,从而,减轻肾组织炎症损伤。最后,作为本文的重点,我们报道了肾炎康复片调节肾组织p38MAPK信号通路而改善阿霉素肾病(Adriamycin-inducednephropathy,ADRN)模型肾组织炎症损伤的分子机制。我们借助单侧肾切除并2次静脉注射阿霉素(Adriamycin,ADR)的方法,建立ADRN模型,观察肾炎康复片对肾组织炎症信号通路p38MAPK的干预作用,试图在体内阐明肾炎康复片通过调节p38MAPK信号通路,减少肾小球内转化生长因子(Transforminggrowthfactor,TGF)-β1的表达和巨噬细胞(Macrophage,MΦ)的浸润,改善肾组织炎症损伤的分子机制。
　　 [方法]将19只SD大鼠按随机数字表方法分为假手术组、对照组和肾炎康复片组。对肾炎康复片组和对照组大鼠行右侧肾摘除术,并在4周内经静脉2次注射阿霉素(4或2mg·kg-1),建立ADRN模型。第2次注射ADR后,肾炎康复片组大鼠经口灌胃肾炎康复片1.2g·kg-1·d-1,并同时以蒸馏水干预对照组,共干预4周。术后每周称量大鼠体重,并检测24h尿蛋白排泄量。术后第4周末处死大鼠,抽取血液,摘除左肾并称重,观察肾小球内巨噬细胞ED1+、ED3+浸润、足细胞及滤过膜超微结构、α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)、Ⅰ型胶原表达(CollagentypeⅠ)以及肾小球形态特征、血清生化指标等,并且,借助Westernblotting检测肾组织内TGF-β1、磷酸化p38MAPK(Phosphorylatedp38MAPK,p-p38MAPK)的蛋白表达。
　　 [结果]肾炎康复片减少了肾小球内巨噬细胞ED1+、ED3+浸润,下调了模型鼠肾组织内TGF-β1和p-p38MAPK蛋白表达,抑制了模型鼠系膜细胞(Mesangialcell,MC)增殖、细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)和胶原(CollagentypeⅠ)沉积,减轻了α-SMA、Ⅰ型胶原表达,同时,还改善了模型鼠的蛋白尿和血清白蛋白(Albumin,Alb),但是,对血清尿素氮(Bloodureanitrogen,BUN)和血清肌酐(Serumcreatinine,Scr)没有影响。
　　 [结论]肾炎康复片在体内具有减轻肾组织炎症损伤的作用;肾炎康复片通过下调肾组织p38MAPK信号通路中关键信号分子——p38MAPK的蛋白表达,干预p38MAPK信号通路的信号转导,减少肾小球内TGF-β1的表达和巨噬细胞的浸润,从而,改善肾组织的炎症损伤。