健脾化瘀方对大肠癌及其肝转移的抑制作用和对大肠癌相关miRNAs表达的影响

摘要

研究目的：
　　 观察健脾化瘀方对人结肠腺癌LoVo细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率以及对皮下移植瘤中大肠癌相关miRNAs表达的影响。建立裸鼠结肠腺癌LoVo细胞脾内种植肝转移模型，观察健脾化瘀方对大肠癌细胞肝转移的抑制作用以及肝转移病灶内miRNAs的表达变化。
　　 研究方法:
　　 1．取人结肠癌腺LoVo细胞接种于小鼠皮下，建立裸鼠结肠癌皮下移植瘤模型，随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组（5-FU组）、健脾化瘀方大剂量组、健脾化瘀方中剂量组、健脾化瘀方小剂量组，观察荷瘤鼠肿瘤生长情况、体积和重量，以及小鼠的生长情况，评价健脾化瘀方对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率。
　　 2．取人结肠癌腺LoVo细胞接种于小鼠脾脏，建立裸鼠结肠癌脾内种植肝转移模型，随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组（5-FU组）、健脾化瘀方大剂量组、健脾化瘀方中剂量组、健脾化瘀方小剂量组，实验结束后观察荷瘤鼠肝转移情况、肝转移灶重量，评价健脾化瘀方对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率。
　　 3．使用实时荧光定量PCR检测健脾化瘀方对裸鼠结肠腺癌LoVo细胞皮下移植瘤以及肝转移病灶中的大肠癌相关miRNAs表达的影响。
　　 研究结果:
　　 1．健脾化瘀方大、中剂量组小鼠皮下移植瘤中瘤体体积及平均重量均小于阴性对照组(P＜0.01)，差异具有统计学意义。
　　 2．各给药组肝转移病灶的重量均小于阴性对照组（P＜0.01或P＜0.05），健脾化瘀方各剂量组病灶重量与阳性对照组（5-FU组）比较，无明差异(P＞0.05)。
　　 3．健脾化瘀方各剂量组皮下移植瘤中miRNA-31的表达下调、miRNA-143的表达上调；健脾化瘀方各剂量组肝转移病灶中miRNA-31的表达下调。
　　 研究结论：
　　 健脾化瘀方对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤以及肠癌细胞肝转移有着显著的抑制作用，其作用可能与下调miRNA-31以及上调miRNA-143的表达有关。

目录

摘要

前言

第一部分 理论研究

1.中医学对大肠癌及大肠癌肝转移的认识

1.1 中医典籍对大肠癌病名的认识

1.2 中医对大肠癌发病的病因病机认识

1.3 中医对大肠癌转移的认识

1.4 健脾化瘀法治疗大肠癌

2.现代医学对大肠癌肝转移的认识

2.1 大肠癌肝转移的机制

2.2 大肠癌肝转移的治疗现状

3.miRNAs与大肠癌的相关性的认识

3.1 miRNAs的产生及作用机制

3.2 miRNA与肿瘤的关系

第二部分 实验研究

1.健脾化瘀方对裸鼠大肠癌皮下移植瘤的抑制作用

1.1 实验材料

1.2 实验方法

1.3 实验结果

1.4 讨论

2.健脾化瘀方对裸鼠大肠癌肝转移的抑制作用

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 实验结果

2.4 讨论

3.RT-qPCR检测健脾化瘀方对裸鼠大肠癌皮下移植瘤及肝脏转移瘤中miRNA-31、miRNA-143表达的影响

3.1 实验材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果

3.4 讨论

第三部分 讨论

1.健脾化瘀法在临床的研究与应用

2.健脾化瘀方中单药的相关研究

3.动物模型的选择

4.健脾化瘀方对miRNA-31，miRNA-143表达的影响

5.本实验的意义及进一步的研究方向

结语

参考文献

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢