从MOT、SS及胃肠道ICC细胞探讨柴胡疏肝散促进肝郁模型鼠胃肠动力作用机制的研究

摘要

目的:观察柴胡疏肝散对肝郁模型鼠胃排空、胃肠激素以及小肠细胞微结构等的影响，从胃肠激素、ICC细胞等角度，揭示该方对肝郁模型鼠胃肠动力的药理学作用及机制，揭示中药从肝治脾整体调节的优势所在。
　　方法:
　　1.肝郁大鼠模型的建立:采用包括禁食、禁水、低温游泳、高温环境、水平震荡、夹尾、昼夜颠倒七种刺激方法，每日随机选用一次，造模3周，并测定造模前后大鼠一般情况、体重、进食量以及强迫游泳不动时间用于评价造模效果。
　　2.柴胡疏肝散对肝郁证大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影响:造模后，按各组剂量每天10 ml·kg-1ig给药2周，柴胡疏肝散高、低剂量组给药浓度分别为:21.0，10.5 g·kg-1，吗丁啉组给药浓度为:10 mg· kg-1，空白组及造模组均给以等体积生理盐水。并于造模前、造模后及给药后分别使用ELISA法测定各组大鼠血清MOT、SS含量，酚红法测定胃排空率。
　　3.柴胡疏肝散对肝郁证大鼠ICC-DMP细胞的影响:取正常组、造模组、给药各组大鼠距离幽门1 cm的上段8 cm的小肠组织，沿系膜缘剖开去除内容物，固定液中固定后常规制备电镜切片，电镜观测ICC-DMP的超微结构。
　　结果:
　　1.实验一结果:造模前后，正常组大鼠的一般状态较为稳定。造模后，造模组大鼠毛发逐渐转为凌乱于结，活动逐渐减少，出现倦怠、乏力、嗜睡等表现;情绪由稳定变为易怒继而低落;进食逐渐减少;大便逐渐变软甚至便溏。造模组强迫游泳不动时间显著延长，与正常组相比，差异显著(p＜0.01)。体重方面，正常组大鼠的体重稳步增长，而造模组体重增长缓慢甚至出现负增长，差异显著(p＜0.01)且这种改变与性别无关，胃肠激素方面，造模前后对比，造模各组MOT分泌明显减少(P＜0.05）而SS分泌均明显升高（P＜0.05）。
　　2.实验二结果:造模前后对比，实验二结果与实验一基本相似，可认为造模成功。给药后，进食量方面，给药组与正常组进食量相当（P＞0.05）。且较模型组进食量均有增加（P＜0.05），其中吗丁啉组日均进食量增加更为明显(P＜0.01)。体重方面，各组大鼠体重均有回升，尤其以吗丁啉组回升较快，与造模组相比差异显著（P＜0.05）。给予中药的两组大鼠，低剂量组体重恢复速度较慢，然而高剂量组恢复速度较快。行为学指标方面，造模组不动时间长于空白组(P＜0.05），而中药高、低剂量组不动时间均显著短于造模组及西药组（P＜0.05），且中药组间没有明显差异。胃排空方面，正常组及各给药组胃排空率均高于模型组(P＜0.05)，且柴胡疏肝散低剂量组差异更为明显(P＜0.01)，而各治疗组间差异不显著（P＞0.05）。胃肠激素水平方面，造模组MOT分泌虽有所恢复，与空白组无统计学意义，但是总体仍小于空白组，而给药组MOT水平均高于造模组及空白组（P＜0.05）。给药后，与正常组相比，吗丁啉组血清SS含量降低（P＜0.05）。与模型组相比，给药组血清SS含量均有显著下降(P＜0.01)。
　　4.实验三结果:肝郁证模型组ICC-DMP总体数目减少，与平滑肌细胞及神经纤维末梢有缝隙连接;细胞呈多边形，胞质少，线粒体扩张、脊断裂，粗面内质网扩张，细胞核内常染色质丰富。经高剂量柴胡疏肝散治疗后，ICC-DMP数量明显增加，细胞呈梭形，胞质稀少，胞质内糖原颗粒丰富，部分内质网扩张，细胞核杆状，异染色质丰富，部分线粒体肿胀，但明显少于造模组。低剂量柴胡疏肝散治疗后大鼠小肠ICC-DMP结构改善及数量恢复虽不及高剂量组，但已有好转趋势。吗丁啉组ICC-DMP结构改善尚不明显。
　　结论:
　　1.柴胡疏肝散增加大鼠进食量及体重，缩短强迫游泳的不动时间。
　　2.柴胡疏肝散改善肝郁模型大鼠胃肠动力的机制可能是通过上调血液MOT、SS含量。
　　3.柴胡疏肝散可以一定程度上促进模型大鼠小肠ICC-DMP的数量和形态的恢复。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

前言

第一章 理论研究

1．中医对功能性消化不良的认识

1．1 病因病机认识

1．2 辨证分型

1．3 治疗方法

2．西医学对于功能性消化不良的认识

2．1 对病因认识的进展

2．2 对发病机制的研究进展

2．3 功能性消化不良的治疗

第二章 实验研究

第一节 实验一：肝郁证大鼠模型的建立

材料与方法

第二节 实验二：柴胡疏肝散对肝郁证大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影响

材料与方法

第三节 实验三：柴胡疏肝散对肝郁证大鼠ICC-DMP细胞的影响

材料与方法

参考文献

结语

附录

攻读硕士研究生期间获得的研究成果

致谢

个人简历