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余干辣椒辣椒碱提取纯化工艺及其抗炎作用研究

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第一章 文献综述

1.1研究意义

1.2 辣椒研究概述

1.3 辣椒碱的研究进展

1.4课题来源

第二章 超声波辅助提取余干辣椒中辣椒碱的工艺优化研究

2.1 材料与处理

2.2方法

2.3 结果与分析

2.4 结论

第三章 大孔树脂纯化余干辣椒辣椒碱工艺研究

3.1 材料与处理

3.2 试验方法

3.3 结果与分析

3.4 结论

第四章 辣椒碱对LPS诱导的RAW264.7细胞因子分泌的影响

4.1 材料与处理

4.2 方法

4.3 结果与分析

4.5 讨论

4.6 结论

第五章 辣椒碱对RAW264.7细胞因子基因表达的影响

5.1 材料与处理

5.2 试验方法

5.3 结果与分析

5.4 讨论

5.5 结论

结论与展望

本研究的初步成果

本研究存在的问题及展望

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

本文以余干辣椒为研究对象,研究了超声辅助法提取辣椒碱的最佳工艺,大孔树脂纯化辣椒碱的工艺,辣椒碱抗炎及其抗炎机理,结果如下:
  通过单因素试验考察了提取溶剂、溶剂体积分数、超声功率、超声时间、超声温度、料液比以及提取级数对辣椒碱得率的影响。在单因素的基础上,选择溶剂体积分数、超声功率、超声时间、超声温度为因素,采用三水平四因素正交试验对超声辅助提取辣椒碱的工艺参数进行优化。结果表明超声辅助提取余干辣椒辣椒碱的最佳工艺条件为甲醇体积分数55%,超声功率108W,超声时间25min,超声温度60℃,在此工艺条件下辣椒碱的得率为1.07%,较一般溶剂提取法高。
  研究了大孔树脂纯化余干辣椒辣椒碱的工艺,首先比较了AB-8、S-8、NKA-Ⅱ、NKA-9、X-5、D101对余干辣椒辣椒碱的吸附量和解析率。发现D101具有较高的吸附量和解析率,故选择D101树脂纯化余干辣椒辣椒碱。静态吸附和解析试验结果显示,辣椒碱的最佳上样浓度为0.5mg/ml,上样pH为5,吸附时间为5h,解析液浓度为95%,解析时间为30min,解析液pH为6。上样流速为0.5ml/min,洗脱流速为1ml/min。在此工艺下将粗提物辣椒碱的纯度由2.35%提高到27%。
  采用LPS刺激RAW264.7建立体外炎症模型,通过检测不同浓度辣椒碱处理下LPS炎症细胞细胞因子分泌量,来研究辣椒碱的抑炎作用。结果表明,低剂量的辣椒碱处理组中IL-1β、TNF-α和IL-6与阳性处理组相比差异不显著(p>0.05)。中剂量和高剂量的辣椒碱下能显著降低LPS炎症细胞中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌。辣椒碱各剂量组IL-10的分泌量与LPS阳性组比较无显著性差异(p>0.05)。一定剂量浓度的辣椒碱能降低LPS刺激的RAW264.7细胞IL-1β、TNF-α和IL-6而有一定的抑炎作用。此外还通过对RAW264.7中上述细胞因子基因表达进行了研究。结果表明,低剂量的辣椒碱处理的炎症细胞IL-1β和IL-6表达量较阳性组高,中剂量和高剂量组IL-1β和IL-6的表达量较阳性组低。各剂量组中炎症细胞中TNF-α和IL-10的表达量较阳性无显著差异(p>0.05)。表明辣椒碱对IL-1β和IL-6的分泌调控是通过基因水平上的调控,对TNF-α分泌的影响并没有通过控制基因表达,对IL-10这个细胞因子几乎不起调控作用。

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