声明
摘要
第一章 文献综述
1.1 昆虫G蛋白偶联受体的研究现状
1.2 LPH的研究现状
1.2.1 Latrophilin的结构
1.2.2 LPH的配体的研究
1.2.3 Latrophlin的功能研究
1.3 蛋白质组学在昆虫研究中的应用
1.3.1 蛋白质组学的概念
1.3.2 蛋白组学的研究内容
1.3.3 蛋白质组学研究策略
1.3.4 蛋白组学的研究技术
1.3.5 蛋白质组学在昆虫研究中的运用
1.4 本研究的目的和意义
第二章 LPHL的进化及其RNAi分析
2.1 实验材料和方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验仪器
2.1.3 实验试剂
2.2 实验方法
2.2.1 LPHL的鉴定和进化分析
2.2.2 提取总RNA
2.2.3 逆转录合成cDNA
2.2.4 lphl全长cDNA克隆
2.2.5 lphl的表达模式
2.2.6 合成lphl的dsRNA
2.2.7 注射dsRNA
2.2.8 LPHL对有机磷农药辛硫磷的抗药性的作用
2.2.9 信号通路的分析
2.2.10 数据处理
2.3 结果与分析
2.3.1 LPHL的进化分析
2.3.2 lphl在赤拟谷盗的克隆及表达模式分析
2.3.3 lphl对赤拟谷盗生长发育的影响
2.3.4 lphl对有机磷农药辛硫磷的拮抗作用
2.3.5 lphl信号通路初步研究
2.4 讨论
第三章 赤拟谷盗LPHL敲减后差异蛋白质组学分析
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验仪器
3.1.3 实验试剂
3.2 实验方法
3.2.1 蛋白样品制备
3.2.2 蛋白质定量
3.2.3 水化上样
3.2.4 等点聚焦
3.2.5 胶条的平衡
3.2.6 二向SDS电泳
3.2.7 二向电泳步骤
3.2.8 染色
3.2.9 凝胶扫描及图像分析
3.2.10 切点进行胶内酶解
3.2.11 质谱分析和数据库搜索
3.3 结果与分析
3.3.1 蛋白上样量的优化
3.3.2 等电聚焦伏时数的优化
3.3.3 IEF胶条的优化
3.3.4 显色时间的优化
3.3.5 总体优化结果
3.3.6 差异蛋白的比对及分析
3.4 讨论
第四章 结论
参考文献
在读期间已发表的学术论文及研究成果
致谢