大豆种子中贮藏有丰富的蛋白质，其中绝大部分是球蛋白，主要包括大豆球蛋白(Glycinin)和伴大豆球蛋白(conglycinin)。有研究表明，伴大豆球蛋白水解肽具有特殊的生理活性，能够降低血压，提高免疫力，抗氧化等作用。本实验室的工作已经证明伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对人和动物胃肠道优势菌群——双歧杆菌具有促生长作用。目前有学者报道有的蛋白水解物(如酪蛋白水解物)对有害细菌有明显的抗菌作用。伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽是否也具有抗有害细菌的作用，目前未见有报道。本研究通过体外实验，观察伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对病原性大肠杆菌生长的影响；通过动物实验探讨了水解肽对动物抗大肠杆菌感染的作用；利用PCR-DGGE研究了水解肽对动物胃肠道微生物区系的影响。1.伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对大肠杆菌生长的影响伴大豆球蛋白是大豆储藏蛋白的一种，有关实验研究表明其水解产物具有多种生理功能。本实验旨在探讨伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对E.coLiO<,138>生长的作用。实验中选用普通肉汤和M<,9>两种培养基，伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽和盐酸彻底水解伴大豆球蛋白液，利用96孔细胞培养板两倍稀释法，进行E.coLiO<,138>培养实验。实验结果显示当伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽含氮量大于520ug/m1时，对E.coLiO<,138>生长有抑制作用。 2.伴大豆球蛋白水解肽对小鼠抗大肠杆菌感染的作用 本实验研究伴大豆球蛋白水解肽对小鼠抗大肠杆菌感染的作用。首先确定E.coLi O<,138>半数致死剂量。选用21日龄昆明系清洁级雄性小鼠，随机分为5个处理组，饲喂基础日粮3d后，将E.coLiO<,138>(菌浓为2×10<,11>CFU/L)依次10倍稀释，分别灌喂5个处理组，每组0.2mL／只，计算灌菌56h后，其LD<,50>值为4.73×10<'10>CFU／L。免疫学指标测定：分两批选用21日龄昆明系清洁级雄性小鼠，随机分为6个处理组：NOR组(正常对照组)：FEC组(灌菌对照组)：基础日粮+生理盐水；HCL-FHC组：基础8瓣盐酸彻底水解伴大豆球蛋白液；Conglycinin组：基础日粮+伴大豆蛋白；PTC组：基础日粮+伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽：P2-PTC组：基础日粮+水解肽提纯B组分；除NOR组和FEC组外，各处理组灌喂液体的总合氮量相等(3g／L)，0.2mL／只。连续灌喂21 d后，第22天中午将E.coli O<,138>(第1批菌浓为2×10<'9>CFU／L—0.042LD<,50>第2批菌浓为2×10<'11>CFU／L—4.2LD<,50>)分别灌喂FEC至P2-PTC组，0.2mL／只。观察小鼠发病及死亡情况直至灌菌后48h，处死各组小鼠，取血、脾脏和整段小肠，用放射免疫分析(RIA)法测定免疫学指标。结果显示：小鼠灌喂伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽后，对感染不同剂量E.coli，反应不同。伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽能显著提高灌喂2×10<'9>CFU／L E.coli O<,138>后小鼠脾脏IL-2水平(P2-PTC组19.2±9.6μg／g vs NOR组11.5±4.7μg／g，p<0.05；P2-PTC组19.2±9.6μg／g vs FEC组9.4±3.7μg／g，p<0.01)，能提高肠黏膜sIgA水平；显著降低脾脏IL-6(P2-PTC组127.1±52.8 ng/g vs NOR组276.4±60.1ng／g，p<0.01；P2-PTC组127.1±52.8 ng／g vs FEC组224.5±38.9 ng／g，p<0.05)和TNF-α(PTC组9.1±2.0μg／g vs NOR组16.3±3.91μg／g，p<0.05)水平；但对血清IL-2水平无显著性影响；显著提高灌喂2×10<'11>CFU／L E.coli O<,138>后小鼠脾脏IL-6水平(P2-PTC组480.5±184.7 ng／g vs NOR组206.7±72.3 ng／g，p<0.05)，极显著提高脾脏TNF-α水平(P2-PTC组43.3±5.8μg／g vs NOR组10.5±4.1μg／g，P<0.01；P2-PTC组43.3±5.8μg／g vs FEC组19.7±9.0μg／g，p<0.01)；降低血清IL-6，TNF-α水平(P2-PTC组2.8±1.0μg／L vs FEC组4.6±2.0gg／L，p<0.05)。本实验结果表明伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽能提高动物机体免疫机能，抵御外源性大肠杆菌的侵袭感染，预防胃肠道疾病的发生。3．服用伴大豆球蛋白水解肽对小鼠灌喂大肠杆菌后肠道微生物区 系和健康的影响 本实验研究服用伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽的小鼠，灌喂E.coli(2×10<'11>CFU／L)后的健康状况，分析小鼠灌喂E.coli后24h，48h粪样微生物区系的变化。应用PCR-DGGE技术对小鼠粪样微生物区系进行相似性分析；应用连续稀释PCR的方法检测小鼠灌喂E.coli后24h，48h粪样中细菌的数量；同时观察小鼠灌喂E.coli后的健康状况。实验结果显示小鼠灌喂E.coli后24h，盐酸彻底水解伴大豆球蛋白液组(HCL-FHC)和灌菌对照组(FEC)的相似性较高(71.5％)，伴大豆球蛋白组(Conglycinin)和伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽组(PTC)与正常对照组(NOR)的相似性都较高(分别为82.4％和72.9％)；灌喂E.coli后48h，NOR组和FEC组的相似性不高(59.6％)，PTC组和NOR组的相似性较高(73.7％)，PTC组和Conglycinin组、HCL-FHC组、FEC组的相似性都不高(分别为51.4％、56.3％、48.1％)，PTC组小鼠粪中细菌的数量明显低于FEC组和HCL-FHC组，同时PTC组健康小鼠的数量明显多于其它处理组。实验结果表明伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽能维持肠道健康的微生物区系，降低肠道细菌的数量，维持感染E.coli后小鼠的健康。
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