鸡球虫3-1E抗原和NA4抗原对4种艾美耳球虫交叉免疫保护作用的研究

摘要

鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫(Eimeria)引起的一种严重危害养禽业发展的寄生原虫病，传统的防制办法还存在一些问题。核酸疫苗是一种新的生物技术疫苗，具有可靠的安全性、高稳定性、能诱导机体产生全面的免疫应答等优点。近年来，鸡球虫核酸疫苗的研究取得了重要进展。 本实验室已从E acervulina和E.necatrix孢子化卵囊分别克隆得到免疫保护性抗原基因3-1E和NA4，并利用DNA重组技术成功构建了免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2和pVAX1.0-3-1E-IL-2，实验表明这两种DNA疫苗对本种球虫感染均具有较好的免疫保护作用。 用DNAStar中的MegAlign软件对3-1E和NA4抗原的基因进行分析，结果发现3-1E抗原在E.tenella和E.acervulina之间基因序列的同源性达99.8％，氨基酸序列的同源性为99.4％；NA4抗原与E.tenella的TA4抗原之间基因序列的同源性达91.4％，氨基酸序列的同源性为86％。用Protean软件对3-1E和NA4抗原的二级结构和抗原性进行预测分析，结果表明这两个抗原均具有很好的抗原性。 将免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IL-2经腿部肌肉分别于14、21日龄两次免疫雏鸡，28日龄经口接种新鲜的E. tenella、E.necatrix、E.acervulina和E.maxima孢子化卵囊，34日龄宰杀全部实验动物，分别作肠道病变计分、肠道卵囊计数、增重和存活率几个指标测定，以抗球虫指数(ACI)综合判定其保护性。结果表明，免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IL-2抗E.tenella、E.necatrix、E.acervulina和E。maxima的ACI值分别为180.11、174.24、180.64和164.74。 用同样的方法对免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2进行交叉免疫保护性实验，结果发现，pVAX1.0-NA4-IL-2抗E.tenella、E.necatrix、E.acervulina和E.maxima的ACI分别为180.35、181.20、171.63和161.89。 本研究通过序列分析和动物交叉免疫保护性实验分别证明了鸡球虫3-1E抗原和NA4抗原对四种艾美耳球虫均具有部分交叉免疫保护作用，这两种抗原有可能作为艾美耳球虫交叉免疫保护性DNA疫苗的候选抗原。

目录

文摘

英文文摘

前言

声明

第一篇文献综述

第一章鸡球虫病免疫的研究进展

1鸡球虫的种类及生活史

2鸡球虫的致病性

3鸡球虫入侵的机理

4鸡球虫的免疫原性

5宿主的免疫应答

6结语

参考文献

第二章鸡球虫疫苗的研究进展

1鸡球虫活苗的研究进展

2亚单位疫苗的研究进展

3核酸疫苗的研究进展

4佐剂的应用

5核酸疫苗的应用前景

参考文献

第三章寄生虫疫苗交叉免疫保护的研究进展

1鸡球虫疫苗交叉免疫保护研究

2其它寄生虫疫苗交叉免疫保护研究

参考文献

第二篇试验研究

第四章毒害艾美耳球虫纯种卵囊收集鉴定及致病性测定

摘要

引言

参考文献

第五章3-1E抗原和NA4抗原在不同种间的基因序列比对及抗原性分析

引言

参考文献

第六章堆型艾美耳球虫免疫调节型DNA疫苗pVAX1．0-3-1E-IL-2的交叉免疫保护性实验

引言

参考文献

第七章毒害艾美耳球虫免疫调节型DNA疫苗pVAX1．0-NA4-IL-2的交叉免疫保护性实验

引言

参考文献

全文总结

致谢