鸡艾美耳球虫抗原基因在减毒沙门氏菌的共表达及免疫效果研究

摘要

本研究以孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东珠子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA.再以PCR方法扩增获得该二基因的开放读框(ORF)后,克隆至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium),构建了EnMIC2、cSZ1及二基因共表达的重组减毒S.typhimurium,经IPTG诱导获得了重组抗原的高效表达,SDS-PAGE分析表明,表达产物分别占菌体总蛋白的8.6﹪、9.2﹪和8.3﹪.将重组减毒S.typhimurium经口免疫雏鸡后,能诱导产生抗鸡球虫重组抗原的特异性IgG和IgA.免疫后3周试验鸡以同源E.necatrix和E.acervulina攻击,可同时获得部分保护,表现为卵囊产量明显减少.