枯萎松树中滑刃科线虫的鉴定与致病性检测

摘要

滑刃科线虫近些年来成为线虫学研究的热点，新种不断被发现，对致病性的研究也非常普遍。在对伞滑刃属线虫的调查研究中，常常能从病死树木或进境木包装材料中分离到滑刃属线虫。本实验室从辽宁省大连市老铁山发现了数株枯萎黑松，后将病木带回并从中分离到一种陌生的滑刃属线虫。本研究经形态观察测量、分子生物学实验，该线虫被证明是一个新种，以其发现的城市命名为大连滑刃线虫（Aphelenchoidesdalianensis sp.nov.）。该线虫的雌虫尾型非常特殊，具有形似触角状的尖端分叉的尾尖突。此外，4条侧线、雌虫的后阴子宫囊、雄虫的交合刺形状等特征可以将其与滑刃属其它线虫种进行区分.它的近似种是大核滑刃线虫（A.macronucleatus），但两者在雌虫尾尖突和雄虫热杀死形态上有明显区别。
　　 同时，本实验室在江苏省张家港市的枯萎马尾松中分离到一种伞滑刃属线虫。本研究经过显微拍照、电镜观测，特征值测记等形态学分类鉴定方法，以及ITS-PCR-RFLP和DNA测序、序列比对等分子生物学研究方法，确定该种线虫为莱奴尔夫伞滑刃线虫（Bursaphelenchus rainulfi）。该线虫有2条侧线；雌虫的阴门有一小的阴门盖，尾端弯向腹面，末端钝圆；雄虫的交合刺很小，弯曲不明显，交合伞卵圆形，短小，仅包住尾部末端。
　　 已有研究表明松材线虫以外的线虫对松树具有潜在的致病性。由于本实验室分离、鉴定出的Aphelenchoides dalianensis和Bursaphelenchus rainulfi都是枯死松树中的优势种，并未发现其它寄生性线虫，故而我们对两者的致病性产生兴趣并进行了研究。通过野外接种实验，检测了两种线虫对湿地松、马尾松和黑松的致病性。实验结果证实B.rainulfi无明显致病性。A.dalianensis对黑松表现出较强的致病性，并造成超过一半的马尾松枯黄衰弱，以及小部分的湿地松表现出一定的枯萎症状。依此结果可以推测出A.dalianensis与大连老铁山的枯死黑松有直接的联系，故而对A.dalianensis进行风险分析，查明分布状况和寄主范围等非常必要。

目录

文摘

英文文摘

上篇 文献综述

第一章 枯萎松树体内已报道寄生线虫的种类

第一节 枯萎松树内已报道的伞滑刃属线虫种类

第二节 枯萎松树内报道的滑刃属线虫种类

第三节 枯萎松树内报道的其它线虫种类

第二章 滑刃科线虫常用的分类与鉴定方法

第一节 形态观察与分类鉴定

第二节 分子生物学的鉴定方法

第三章 滑刃科线虫对松树致病性的研究

第一节 松材线虫对松树致病性及致病性分化

第二节 其它滑刃科线虫对松树的致病性

下篇 研究内容

第一章 枯萎黑松内寄生线虫种类鉴定

1 材料和方法

2 结果与分析

3 讨论

第二章 两种滑刃科线虫致病性研究

1 材料和方法

2 结果与分析

3 讨论

第三章 枯萎马尾松内寄生线虫种类鉴定

1 材料和方法

2 结果与分析

3 讨论

全文结论

参考文献

致 谢