梨黑斑病生防细菌的筛选、鉴定及其生防活性的初步研究

摘要

梨（Pyrus spp.）属于蔷薇科(Rosaceae)梨属（Pyrus）植物，我国是梨的重要起源地之一，是世界第一产梨大国。梨病害的产生及危害是限制我国梨产业健康发展的重要因子之一。据统计梨黑斑病(Pearblackrot)是由链格孢（Alternaria sp.）类真菌引起的一种真菌性病害。梨黑斑病同梨黑星病和轮纹病共称为我国梨树的三大病害。目前控制梨黑斑病的主要方法仍然以化学杀菌剂为主。由于化学杀菌剂存在着抗药性和农药残留的问题，对人体和环境构成威胁。因此，筛选出抗菌谱广，生防活性高和对环境安全的新型细菌，进而制备出高效的生防菌剂，可以作为化学防治梨黑斑病的一种有益补充，减少化学农药的使用量，进而降低其污染。
　　从山东梨树果园采集到25份土壤样品，分离到514株细菌，通过对梨黑斑病菌的室内拮抗实验，筛选出一株对梨黑斑病菌具有强拮抗作用的菌株并将其命名为SD2，室内测定其对梨黑斑病的拮抗圈达到9.5mm。为了明确其拮抗性能，我们室内测定该菌对梨轮纹病菌、梨腐烂病菌、梨炭疽病菌和稻瘟病菌等14种重要园艺和粮食作物病原真菌的拮抗效果，结果显示SD2对上述病原菌均具有较好的拮抗作用，拮抗圈的范围从4mm到17.5mm，拮抗范围较广。同时其对马铃薯软腐病菌也具有一定的拮抗作用，说明该菌对细菌也有拮抗活性。通过对拮抗菌的形态特征、生理生化特征及16SrDNA序列进行综合鉴定分析，该菌株鉴定为爱胜蚓噬几丁质菌（Chitinophaga eiseniae），在已报道的国外文献中，未发现有报道该菌对人体具有致病性，这为后续相关实验研究提供了保证。
　　抗菌活性物质检测结果显示，该菌产生蛋白酶，但不产生几丁质酶、纤维素酶和β-1，3-葡聚糖酶等胞外水解酶。通过对其胞外酶及代谢产物的检测显示，该菌代谢产物抑制梨黑斑病菌黑色素形成、茵丝的正常生长、分生孢子的萌发，同时加热处理代谢产物也具有相似的作用。近年来，国内外已报道酵母菌（Candida sp.）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）对梨黑斑病有一定的抑制，但爱胜蚓噬几丁质菌防治梨黑斑病的研究还未见报道，进一步开发和应用该菌防治梨黑斑病具有一定的前景。

目录

声明

摘要

上篇 文献综述

引言

第一章 梨主要真菌病害及综合防控研究现状概述

1 梨主要真菌病害的研究现状

2 梨病害防治研究现状

第二章 梨黑斑病及生物防治的研究现状

1 梨黑斑病的研究现状

2 生物防治的研究现状

下篇 研究内容

第一章 梨黑斑病生防细菌的筛选鉴定

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二章 爱胜蚓噬几丁质菌SD2对梨黑斑病的生防效果的初步研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

参考文献

附录一 SD2的16S rDNA序列

附录二 发表或待发表的论文

致谢