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【6h】

君迁子组培快繁及叶片再生体系研究

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摘要

缩略词(Abbreviation)

引言

第一章 文献综述

1 柿生物学特性及其应用价值

1.1 柿生物学特性

1.2 柿应用价值

2 柿在我国引种概况

3 柿组织培养的研究进展及存在的问题

3.1 研究进展

3.2 存在的问题

第二章 君迁子的初代培养

1 材料

2 方法

2.1 外植体消毒及接种前处理

2.2 不同基本培养基对君迁子组培苗初代培养的影响

3 培养条件

4 数据分析方法

5 结果与分析

5.1 不同消毒方法对休眠芽初代培养的影响

5.2 不同基本培养基对君迁子组培苗初代的影响

6 讨论

第三章 君迁子的继代培养

1 材料

2 方法

3 培养条件

4 数据分析方法

5 结果与分析

5.1 不同种类、浓度的植物生长素对君迁子继代培养的影响

5.2 不同种类、浓度的植物细胞分裂素对对君迁子继代培养的影响

5.3 ZT+IAA与不同浓度TDZ组合对君迁子继代培养的影响

6 讨论

第四章 君迁子叶片再生培养

1 材料

2 方法

3 培养条件

4 数据分析方法

5 结果与分析

5.1 不同蔗糖浓度对君迁子叶片再生培养的影响

5.2 基本培养基、TDZ、NAA对君迁子叶片再生培养的影响

5.3.不同植物生长素对君迁子叶片再生培养的影响

5.4 不同暗培养时间对君迁子叶片再生培养的影响

6讨论

第五章 君迁子的生根培养、炼苗和移栽

1 材料

2 方法

3 培养条件

4 数据分析方法

5 结果与分析

5.1 不同IBA、IAA浓度对君迁子生根培养的影响

5.2 基本培养基对君迁子生根培养的影响

5.3 不同暗培养时间对君迁子生根培养的影响

5.4 不同IBA、NAA浓度与6-BA不同浓度组合君迁子生根培养的影响

5.5 君迁子组培苗的炼苗、移栽

6 讨论

全文总结

本文创新点

参考文献

附录

攻读硕士学位期间论文投稿与发表情况

致谢

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摘要

为建立君迁子(Diospyros lotus L.)组培快繁及叶片再生体系。以君迁子当年生枝条上的休眠芽为外植体,通过研究不同处理对君迁子离体快繁体系的影响,较系统的建立了君迁子的初代培养、继代增殖培养、叶片再生培养及生根培养技术体系。主要结果如下:
  1.君迁子的初代培养:使用10% H2O2对君迁子休眠芽进行消毒10min、20min、30min的成活率分别是43.3%、63%、50%,成活率最高的消毒时间是20 min,且外植体无褐化现象,成活率高,染菌率和成活率均比使用75%乙醇消毒效果好。该方法有效解决了休眠芽初代褐化严重的问题,明显提高了初代成活率。将君迁子萌发的休眠芽分别接种在添加ZT1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的MS、1/2MS、MS(1/2N)、NN69等4种培养基中,发现改良的(1/2N)MS培养基适于君迁子组培苗的初代培养,组培苗植株平均株高为2.4cm,并且长势好,叶片大而翠绿,基部愈伤组织小,优于生长在其它3种培养基的植株。
  2.君迁子的继代增殖培养:研究了不同种类植物生长素和细胞分裂素对组培苗生长发育情况的影响。最适合君迁子继代增殖培养的的植物生长调节剂组合为ZT2.0+IAA0.1mg/L。为进一步研究不同激素间的组合对君迁子继代增殖培养待影响,在ZT2.0 mg/L+IAA0.1mg/L组合的基础上添加TDZ0.05 mg/L,平均株高2.53 cm,增殖系数可达4.74,明显提高了君迁予继代增殖中的增殖系数,说明适当浓度的TDZ对君迁子继代增殖扩繁有较显著的影响。
  3.君迁子叶片再生培养:采用L9(34)正交试验设计,对影响君迁子叶片再生培养的不同基本培养基、TDZ及NAA组合进行选择优化,筛选出适宜的蔗糖浓度,生长素种类,暗培养时间,结果表明:在蔗糖40g/L+TDZ3.0 mg/L+ NAA0.1 mg/L+MS的培养基中,暗培养10d,君迁子叶片愈伤诱导率为100%,平均不定芽数为4.26个,再生率为94.28%。有效建立了君迁子叶片再生培养的技术体系。
  4.君迁子的生根、炼苗及移栽培养:在MS、1/2MS、MS(1/2N)、NN69等4种培养基的生根比较试验中,发现(1/2N) MS培养基最适合君迁子的生根培养,NN69培养基最不适合君迁子组培苗生根。植物生长素IBA及IAA均能诱导君迁子的生根培养,但IBA优于IAA。为进一步研究植物细胞分裂素对君迁子生根培养的影响,在IBA1.0 mg/L+(1/2N)MS培养基中添加6-BA0.5 mg/L,暗培养3d,生根率达到93.51%,平均根数达到5.06条,效果最好。同时研究了移栽时覆盖薄膜对成活率的影响,君迁子幼苗在移栽时覆盖薄膜30 d后成活率为95%。

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