一种高效的君迁子花粉隔离方法

摘要

本发明涉及一种高效的君迁子花粉隔离方法，属于君迁子育种技术领域。本发明的方法是根据君迁子的雌花着生特点开发的。君迁子的雌花花柄非常短，密集的着生在枝条基部，很难像其它果树一样进行单个花的套袋隔离。利用白乳胶涂抹柱头的方式可以实现花粉高效隔离。具体做法是，在五月上旬，雌花为大花苞时期，用手去掉花瓣，露出柱头，用棉签蘸取白乳胶涂抹柱头，即可隔离君迁子花粉，防止授粉杂交。本发明的方法操作简单，应用本发明可避免因套袋造成的落花及焦叶等问题，可节省人力物力，提高君迁子花粉隔离效率。

说明书

技术领域

本发明属于君迁子育种技术领域，具体涉及一种高效的君迁子花粉隔离方法。

背景介绍

君迁子（

发明内容

本发明是为了克服君迁子花粉隔离现有技术的不足，根据君迁子花器官着生特点，首次利用白乳胶封柱头进行花粉隔离，提供一种高效的君迁子花粉隔离方法，该方法操作简便，应用本发明既可避免因套袋造成的落花及焦叶等问题，又可极显著节省人力物力，提高君迁子花粉隔离效率。为深入开展君迁子无融合生殖研究提供技术支持。

本发明克服现有技术问题所采用的技术方案是：通过几种隔离方法（硫酸纸套袋、白乳胶点涂、切除柱头、聚乙稀醇点涂）在操作难易、用时长短及隔离效果的对比，确定了白乳胶点涂是最佳方案。

本发明所述高效的君迁子花粉隔离方法包括如下步骤：

1）选择需隔离的雌花：初花期（五月上旬），在生长健壮、无病虫害的成龄单株上选择呈大花苞状态的雌花；

2）去除花冠：用手小心去掉整个花冠，露出雌花柱头；

3）立即用白乳胶点涂柱头：利用棉签蘸取适量白乳胶点涂在君迁子柱头上，即可有效隔离花粉。

作为一种优选方案，所有操作在无风晴天进行；

作为一种优选方案，所述步骤3）中，所述白乳胶用量为每单花0.05-0.1g；

作为一种优选方案，所述步骤3）中，所述点涂为包裹住君迁子柱头。

本发明的有益效果在于：（1）白乳胶具有弹性，涂抹到柱头上时不会伤害柱头；（2）白乳胶在风干后能形成保护膜，防止花粉落在柱头上，能有效进行花粉隔离；（3）利用白乳胶花粉隔离克服了现有技术使用的硫酸纸袋套袋的各种弊端，无需多次套袋、取袋，减少落花和焦叶，操作简单方便；（4）白乳胶比较常见，购买方便且成本低廉。

附图说明：

图1白乳胶点涂君迁子柱头操作图；

图2荧光显微镜下观察到白乳胶点涂的君迁子柱头未见萌发花粉；

图3荧光显微镜下观察到未点白乳胶的君迁子柱头上花粉正常萌发。

具体实施方式：

以下实例用来说明本发明，但不用来限制本发明的实施范围。

以下各实例中，试验材料均为生长健壮，无病虫害，长势一致的成龄君迁子。

实例1 荧光显微镜观察君迁子柱头验证隔离效果

在五月中旬，君迁子雌花在大花苞时期时，对君迁子进行白乳胶花粉隔离处理（见图1）。五月上旬，选择呈大花苞状态的雌花，小心去掉雌花花瓣，露出雌花柱头，在无风晴天，利用棉签蘸取白乳胶涂抹君迁子柱头，进行花粉隔离；一是对选定单株进行白乳胶涂抹柱头后人工授粉，分别在1，3，5，8，12，24，48，72h后取柱头用FAA固定液（70%酒精：冰醋酸：福尔马林=18:1:1)固定保存，二是对选定单株进行白乳胶涂抹柱头后分别在1，3，5，8，12，24，48，72h后人工授粉，在12h后取柱头用FAA固定液（70%酒精：冰醋酸：福尔马林=18:1:1)固定保存。

利用荧光显微镜观察花粉在柱头上的生长情况，验证白乳胶隔离效果。取出固定好的材料，将固定液中倒出，用蒸馏水冲洗花柱和子房，然后将材料放在2 mL的离心管中，离心管中装入2 mL的10 mol/L的NaOH溶液塞在塑料泡沫上，放在60℃恒温水浴锅中水浴8h。倒掉NaOH溶液，用蒸馏水冲洗材料三次，加入1.5 mL 0.01%的水溶性苯胺蓝溶液，染色过夜。利用荧光显微镜观察发现，经过涂抹白乳胶的君迁子柱头上没有存在花粉，说明利用白乳胶涂抹柱头的方法能有效隔离君迁子花粉，观察照片见图2、图3。

实例2 无融合生殖单株的筛选

五月中旬，君迁子雌花呈大花苞状态时，利用白乳胶涂抹君迁子柱头的花粉隔离方法，对选定的22株君迁子群体进行花粉隔离，挂牌标记。十月统计坐果率、结种率。通过调查分析共在群体中筛选出9个单株（见表1）。

表1 白乳胶点涂隔离花粉法研究君迁子单株的无融合生殖能力