啤酒花浸膏中有效成分的分离纯化及表征

摘要

高效液相色谱法目前已广泛应用于天然产物中生物活性化合物的分离。本文成功建立了啤酒花浸膏中有效成分的高效液相色谱分离纯化工艺，并对最终产物进行表征和定性验证。
　　 首先通过色谱条件优化建立了啤酒花浸膏的HPLC分析方法，6种有效成分(葎草酮、加葎草酮、合葎草酮、蛇麻酮、加蛇麻酮、合蛇麻酮)均达到基线分离，为进一步有效成分的放大制备和纯度检测奠定基础。葎其次依据高效液相制备色谱的线性放大理论及质量超载和体积超载等相关实验，确定了制备色谱条件：在室温下，采用Hypersil C18 10μm色谱柱，流动相为V(乙醇)/V(0.2％冰乙酸水溶液)=65/35，流速15.0mL/min，进样量90mg，检测波长为UV315nm。在此制备条件下收集馏分，通过考察不同的后处理方法除去溶剂，最终确定最佳后处理方案为：先将馏分旋蒸浓缩，再经SPE萃取，之后氮吹，干燥得到黄色浸膏状产物。
　　 最后，采用分析型HPLC法对纯化的固体产物进行纯度检测，纯度高，均在90％以上；并通过UV、FT-IR和LC-MS鉴定其结构，验证确认了目标产品。
　　 本次制备方法工艺简单，生产出的产品纯度高，对进一步工业规模的HPLC分离制备具有一定的指导意义。

目录

文摘

英文文摘

声明

1绪论

1.1啤酒花浸膏简介

1.1.1啤酒花

1.1.2啤酒花浸膏

1.2啤酒花浸膏有效成分分析研究概况

1.3啤酒花浸膏有效成分分离纯化研究概况

1.3.1方法介绍

1.3.2制备型高效液相色谱介绍

1.4论文的主要内容

2分析型HPLC系统上的分析研究

2.1实验试剂及仪器

2.2实验方法

2.2.1样品预处理方法

2.2.2色谱条件优化

2.3结果与讨论

2.3.1样品的理论分析

2.3.2加酸对分离效果的影响

2.3.3有机相对分离效果的影响

2.3.4温度对分离效果的影响

2.3.5分析条件的确定

2.4本章小结

3分析放大到制备的超载研究

3.1实验试剂及仪器

3.2实验方法

3.2.1样品溶解性方法研究

3.2.2超载实验方法研究

3.2.3线性放大方法研究

3.2.4色谱柱饱和容量计算方法

3.3结果与讨论

3.3.1质量超载对分离效果的影响

3.3.2体积超载对分离效果的影响

3.3.3线性放大技术确定分离条件

3.4本章小结

4制备型HPLC系统上的分离纯化

4.1实验仪器及试剂

4.2实验方法

4.2.1制备型HPLC分离方法

4.2.2馏分后处理方法

4.3结果与讨论

4.3.1制备色谱收集馏分

4.3.2对馏分进行后处理

4.3.3产率和成本计算

4.3.4产品的纯度检测

4.4本章小结

5产品结构表征与鉴定

5.1实验仪器

5.2实验方法

5.2.1紫外光谱法(UV)

5.2.2傅里叶红外光谱法(FT-IR)

5.2.3液质联用法(LC-MS)

5.3结果与讨论

5.3.1紫外光谱分析

5.3.2傅里叶红外光谱分析

5.3.3质谱结构解析

5.4本章小结

6结论

致谢

参考文献