趋化因子受体CCR7与PI3K/Akt通路在人胃癌组织中表达的实验研究

摘要

目的：观察CC类趋化因子受体7(C-C chemokine receptor 7，CCR7)和磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶(serine/threonine kinase，Akt)在人胃癌组织和癌旁对照组织中的表达情况，研究CCR7和P-Akt在人胃癌和癌旁组织中的表达情况及其与临床病理因素的关系，探讨CCR7与PI3K/Akt通路的相关性。 方法：收集徐医附院手术切除的32例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常组织，根据术后病理报告，并按照1997年国际抗癌联盟(International Union AgainstCancer，UICC)的分期标准进行分期。其中肿瘤直径≥5 cm 18例，<5 cm 14例；中低分化22例，高分化10例；肿瘤穿透浆膜层11例，未穿透浆膜层21例；有淋巴结转移19例，无淋巴结转移13例；有远处转移7例，无远处转移25例；TNM分期Ⅰ、Ⅱ期20例，Ⅲ、Ⅳ期12例。采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)法检测胃癌及相应癌旁对照组织中CCR7mRNA、P13KmRNA、AktmRNA的表达；采用Western blot法检测胃癌以及相应癌旁对照组织中CCR7、P-Akt蛋白的表达。应用Image J图像分析系统对RT-PCR和Western blot结果进行图像分析，计算条带与β-actin的灰度比值。 结果： 1．CCR7mRNA、PI3KmRNA、AktmRNA在人胃癌和癌旁组织中的表达情况：RT-PCR结果显示了32例胃癌组织中CCR7mRNA、PI3KmRNA、AktmRNA的表达量(1.18±0.13，2.20±0.12，2.56±0.14)，癌旁对照组织的表达量(0.71±0.13．1.22±0.19，1.37±0.11)，三种基因在癌与癌旁组织中的表达均具有显著性差异(P<0.05)。且CCR7分别与PI3K和Akt的表达呈正相关(r=0.42，P<0.05；r=0.44．P<0.05)。CCR7mRNA在胃癌组织中的表达与TNM分期、浸润深度有关(P<0.05)，并且和有无淋巴结转移有关(P<0.05)，但均与肿瘤大小、分化程度、有无远处转移无关(P>0.05)。 2．CCR7、P-Akt丝氨酸473位点(serine-473，ser-473)在人胃癌和癌旁组织中的表达情况：Western blot结果显示了胃癌组织中CCR7、P-Akt的表达量(3.29±0.22，3.58±0.21)，癌旁对照组织表达量(1.43±0.15，1.21±0.14)。CCR7、P-Akt的表达水平显著高于癌旁对照组织(P<0.05)。两者在胃癌组织中的表达与TNM分期有关(P<0.05)，与肿瘤的浸涧深度、分化程度有关(P<0.05)，且均与有无淋巴结转移、有无远处转移的因素有关(P<0.05)。但两者表达与肿瘤大小无关(P>0.05)。经Pearson相关性分析显示，CCR7、P-Akt表达呈正相关(r=0.43，P<0.05)。 结论： 1．CCR7可能参与了胃癌的发生以及浸润转移的分子机制。 2．CCR7与PI3K、Akt在胃癌的发生发展过程中起正调控作用，CCR7可能上调PI3K、Akt的表达。 3．CCR7可能通过激活PI3K/Akt信号通路参与胃癌的浸润、转移。

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论文说明：缩略词表

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前言

材料和方法

1材料

2方法

3图像处理

4统计学处理

结果

讨论

结论

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参考文献

趋化因子及其受体与肿瘤生长转移的关系 综述

攻读硕士学位期间发表学术论文题目

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