还原型谷胱甘肽对胰腺炎相关性腹水诱导大鼠肝损伤保护作用的实验研究

摘要

目的：研究大鼠经腹腔内注射胰腺炎相关性腹水(PAAF)诱导的急性肝损伤模型以及还原型谷胱甘肽(GSH)对该损伤疗效及机制，旨在探讨该模型的意义，并为临床合理治疗急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）并发的肝损伤提供一定的实验理论依据。
　　 方法：用40只大鼠制备AHNP模型并收集PAAF，取其中的8只作为AHNP组，观察其胰腺和肝脏的损伤程度并测定血清ALT、AST浓度。另取48只正常SD大鼠随机分为3组，每组16只：A组（空白对照组）腹腔内注射生理盐水8ml/只，B组（模型组）腹腔内注射PAAF 8ml/只，C组(GSH治疗组) 在向腹腔内注射PAAF 8ml/只前lh于尾静脉注射GSH 400mg/kg，相应地A、B两组仅以等容积的生理盐水替代GSH尾静脉注射。各组动物自由饮水进食，腹腔注射后6h、12h分批处死大鼠，每时间点8只。测定大鼠肝功能血清学指标(ALT、AST)、血清淀粉酶（AMY）浓度；TBA法检测肝脏组织丙二醛（MDA）含量；取肝脏组织固定包埋后制备组织切片行免疫组织化学染色测定其NF-κB活性，HE染色光镜观察胰腺及肝脏损伤情况；ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）；TUNEL法定量检测肝细胞凋亡率。
　　 结果：B12h 组血清ALT、AST及肝脏病理学评分与AHNP组相比差异无统计学意义（P>0.05）；B组血清ALT、AST、AMY较同时间段A组升高（P<0.05），血清TNF-α、IL-6浓度及肝组织MDA含量亦较A组升高(P<0.05)，B组肝细胞水肿及核固缩，大量炎性细胞浸润，C组与同时间段B组相比上述各指标均有降低(P<0.05)，肝脏病理损害亦有所减轻；B12h组胰腺损伤轻微，可以看到腺泡结构及胰岛结构完整，仅腺叶间隔增宽，轻度水肿，少量炎性细胞浸润，比AHNP组胰腺病变明显减轻；NF-κB表达三组两两比较差异均有统计学意义（P<0.05），C组表达较同时段B组降低，差异有统计学意义（P<0.05）；肝细胞凋亡三组比较差异有统计学意义（P<0.05），C组较同时段B组降低，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　 结论：
　　 1．PAAF可以诱导肝脏组织损伤，该模型的建立是成功的；
　　 2．该模型能够“屏蔽”胰腺坏死性病变对肝脏的影响；
　　 3．PAAF诱导的肝脏损伤与氧自由基、炎症递质及肝组织NF-κB的表达增强有关；
　　 4．GSH通过抗氧自由基、炎症递质及抑制肝脏组织NF-κB的表达作用，减轻PAAF诱导的肝损伤程度。