糖尿病大鼠肾组织中MMP-2和MMP-9的表达及腺相关病毒介导血管抑素的干预研究

摘要

目的:
　　 (1)观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病大鼠肾组织中的表达情况;
　　 (2)探讨腺相关病毒介导血管抑素(recombinant adeno-associated virus carrying human angiostatin gene,rAAV-AS)对糖尿病肾病大鼠肾皮质中MMP-2和MMP-9表达的影响及可能机制。
　　 方法:采用链脲佐菌素(STZ)60mg/kg腹腔注射法建立糖尿病动物模型。清洁级SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠随机分为正常组(NC组,n=10),糖尿病肾病组(DN组,n=15),腺相关病毒空载体组(rAAV-0组,2×1012VG/kg BW,n=15),腺相关病毒介导血管抑素组(rAAV-AS组,2×1012VG/kg BW,n=15);第10周检测大鼠的微量白蛋白尿及肾脏肥大指数、肾功能、血糖、糖化血红蛋白;免疫印迹法检测肾组织中血管抑素的表达,免疫组化法观察肾皮质内MMP-2、MMP-9表达的变化,光镜观察肾组织病理变化。
　　 结果:
　　 (1)免疫印迹法结果:与NC组比较,DN组及rAAV-0组AS表达均减少,rAAV-AS组大鼠肾组织中AS表达明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05);
　　 (2)生化指标结果:与NC组比较,rAAV-AS组、DN组及rAAV-0组BG、HbA1c、SCr、MAU、BUN均明显升高(P＜0.05);rAAV-AS组SCr、MAU、BUN较DN组及rAAV-0组降低(P＜0.05),但各组间BG、HbA1c差异无统计学意义(P＞0.05)。DN组与rAAV-0组各指标间差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 (3)免疫组化结果:NC组中MMP-2、MMP-9在肾小球及肾小管中均有微量表达,DN组及rAAV-0组的表达则明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05),且主要在肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞,而rAAV-AS组的表达较DN组及rAAV-0组增强,差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论:
　　 (1)通过腺相关病毒载体介导,血管抑素可以在肾组织中持续较高水平的表达;
　　 (2)糖尿病大鼠肾组织中MMP-2和MMP-9的表达水平明显减少;
　　 (3)rAAV-AS对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能是通过增加糖尿病大鼠肾组织中MMP-2和MMP-9的表达,从而减少肾组织细胞外基质(ECM)的积聚有关,且这种保护作用不依赖于血糖的降低。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

前言

材料和方法

1.材料

2.方法

3.统计学分析

结果

讨论

结论

论文图片

参考文献

综述:MMP-2和MMP-9与糖尿病肾病

攻读硕士学位期间发表学术论文题目

临床培训小结

致谢