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Cyclopamine对正常和肝硬化大鼠肝脏星状细胞活化、增殖和凋亡的影响

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前言

材料和方法

Ⅰ.材料

Ⅱ.实验方法

结果

讨论

结论

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参考文献

肝星状细胞与肝硬化关系的研究进展 综述

参考文献

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摘要

目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂-环巴明(cyclopamine)对正常和肝硬化大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)活化、增殖和凋亡的影响。
   方法:20只雄性SD大鼠随机分为2组:第一组为正常大鼠(n=10);第二组为肝硬化大鼠(n=10)。后组采用硫代乙酰胺(Thioacetamide,TAA)饲喂法复制肝硬化模型。分别提取两组大鼠HSC,体外培养、扩增后,免疫细胞化学法鉴定。分别用cyclopamine干预正常和肝硬化大鼠的HSC,并设置相应对照组。实验分为以下4组:(1)正常大鼠HSC对照组(A组);(2)正常大鼠HSC cyclopamine组(B组);(3)肝硬化大鼠HSC对照组(C组);(4)肝硬化大鼠HSC cyclopamine组(D组)。
   MTT法、流式法检测cyclopamine对HSC增殖、凋亡的影响,蛋白印记法(Western-blot)检测其对HSC活化标记物α-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)表达水平的影响。
   结果:成功构建大鼠肝硬化模型。成功分离得到HSC。与相应对照组相比,正常和肝硬化大鼠HSC cyclopamine组细胞增殖抑制率及凋亡率均明显增高(P<0.05),且a-SMA蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与正常大鼠HSC cyclopamine组相比,肝硬化大鼠HSC cyclopamine组细胞增殖抑制率、凋亡率以及α-SMA蛋白抑制率均明显增高(P<0.05)。
   结论:Cyclopamine可抑制正常和肝硬化大鼠HSC的活化、增殖,并能促进其凋亡,这些效应对于肝硬化大鼠HSC均更加显著。

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