AM251对1型糖尿病肾病大鼠足细胞病变的干预研究

摘要

目的：本实验通过观察大麻素受体拮抗剂AM251干预后1型糖尿病肾病大鼠尿蛋白及足细胞裂隙膜蛋白nephrin和podocin的变化，探讨CB1拮抗剂AM251对1型糖尿病肾病大鼠足细胞病变的影响。
　　方法：(1)选择40只健康雄性SD大鼠，体重200-250g，随机分组:正常对照组(n=20)，和糖尿病肾病模型组(n=20)。糖尿病肾病模型组大鼠禁食12小时后给予1％链脲佐菌素(55 mg/kg)一次性腹腔注射，注射后72小时尾静脉取血测血糖，以血糖≥16.7mmol/l为糖尿病造模成功。造模成功后分别于第7、14、28天再次测血糖，仍符合上述标准者为稳定成模的大鼠。大鼠成模稳定后至少1月的时间测大鼠24小时尿蛋白，以24h尿蛋白≥30mg者为糖尿病肾病造模成功。成模者进入后续实验，未成模者退出实验。正常组大鼠按体重随机分为两组:正常生理盐水对照组（A组）和正常AM251干预组（B组）。糖尿病肾病成模组大鼠按体重随机分为两组:糖尿病肾病未治疗组（C组）和糖尿病肾病AM251干预组（D组）。从糖尿病肾病造模成功开始起B组和D组大鼠每日按1 mg/kg给予AM251（溶于10％，二甲基亚砜溶液中），腹腔注射，连续12周，A组和C组以等体积的0.9％生理盐水，腹腔注射，连续12周。实验结束时检测各组大鼠24h尿蛋白、肌酐清除率、肾质量/体质量;HE染色观察肾脏病理;透射电镜观察肾小球超微结构;免疫印迹法半定量测定CB1、nephrin、podocin蛋白的表达。
　　结果：(1)A组和B组24小时尿蛋白、肌酐清除率、肾质量/体质量、CB1受体蛋白、nephrin、podocin蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;肾脏病理示足细胞无明显变化。(2)与A组相比，C组24小时尿蛋白、肾质量/体质量升高（P＜0.05）;肌酐清除率降低(P＜0.05);CB1受体蛋白表达增多(P＜0.05); nephrin、podocin蛋白表达减少(P＜0.05);肾脏足细胞数减少、足突宽度(FPW)增加并融合、肾小球基底膜(GBM)增厚（P＜0.05）。(3)与A组比较，D组24小时尿蛋白、肾质量/体质量升高（P＜0.05）;肌酐清除率降低(P＜0.05);CB1受体蛋白表达增多（P＜0.05）;nephrin表达减低(P＜0.05)、podocin蛋白表达减低不明显（P＞0.05）;足突融合率增加（P＜0.05）;足细胞个数减少、足突增宽及肾小球基底膜(GBM)增厚不明显(P＞0.05)。(3)与C组相比，D组24小时尿蛋白、肾质量/体质量降低（P＜0.05）;肌酐清除率升高(P＜0.05)、CB1受体蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;nephrin、podocin蛋白表达增加（P＜0.05）;足细胞数增加、足突增宽及足突融合减轻、肾小球基底膜(GBM)增厚减轻（P＜0.05）。
　　结论:AM251可增加足细胞相关分子nephrin、podocin的表达、改善足细胞超微结构，这可能是减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白机制之一。

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摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

足细胞损伤与糖尿病肾病 综述

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

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