CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞对照射损伤小鼠造血重建的影响

摘要

目的：探讨过表达C-X-C型趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type4，CXCR4)基因的骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell，MSCs)移植在照射损伤小鼠体内归巢情况及对造血重建的影响。
　　方法：采用293FT细胞包装共表达EGFP和CXCR4慢病毒载体，转导MSC建立稳定共表达EGFP和CXCR4基因的MSCs(CXCR4-MSC)，同时建立稳定表达EGFP的MSCs(EGFP-MSC)作为对照，经尾静脉输注接受亚致死剂量（总剂量3.5Gy）照射的BALB/c小鼠。MSCs的输注量5×105个，设立单纯照射组为对照组。观察小鼠的一般生存状态，统计生存率。冰冻切片观察MSCs在受鼠体内分布，流式细胞术检测MSCs归巢效率。于3、7、14、21、28d进行外周血计数白细胞(WBC)和红细胞(RBC)，流式细胞术检测骨髓中干细胞比例、血小板(PLT)数量、网织红细胞比例及网织血小板比例。病理观察移植后各组骨髓、脾脏恢复情况。聚合酶链式反应检测MSCs在受鼠体内植入情况。
　　结果：CXCR4-MSC表面CXCR4的表达明显高于对照组，且不影响其增殖与凋亡。冰冻切片与流式细胞术结果均显示过表达CXCR4可提高MSCs归巢效率，ELISA结果显示照射后小鼠外周血及骨髓中基质细胞衍生因子1(stromal cellderived factor-1,SDF-1)水平均升高。输注MSCs可促进骨髓中造血干细胞恢复，小鼠外周血象呈先下降，继而上升的趋势。其中，WBC在1周后开始恢复，且CXCR4-MSC组恢复速度明显快于其他两组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。病理结果显示，CXCR4-MSC组造血器官照射损伤后修复较快。同时发现，移植后7、14、21、28 d均可检测到MSCs植入。
　　结论：过表达CXCR4基因可促进MSCs归巢，并促进照射损伤小鼠造血功能的恢复。

目录

研究生个人简介

绾略词表

摘要

前言

第一部分 过表达CXCR4基因的骨髓间充质干细胞鉴定及在照射损伤小鼠体内的归巢情况分析

材料和方法

结果

第二部分 过表达CXCR4基因的骨髓间充质干细胞对照射损伤小鼠造血重建的影响

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

间充质干细胞时T细胞免疫调节作用的研究进展

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

声明

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