白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠保护作用的研究

摘要

血管性痴呆(vasculardementia，VD)是继阿尔茨海默病之后第二位最常见的痴呆症，在我国老年人中尤为常见和多发。随着社会的老龄化程度加剧，近年来国内外越来越重视对血管性痴呆的研究。 滨海白首乌为萝蘑科植物耳叶牛皮消(CynanchumauriculatumRoyleexWight)的块根。据报道白首乌有很多显著的药理作用，如抗肿瘤、增强免疫功能、抗氧化、延缓衰老等。但滨海白首乌对血管性痴呆的防治作用国内外鲜有报道。本文通过建立血管性痴呆的小鼠模型，从整体动物实验考察了白首乌提取物对血管性痴呆的防治作用。 白首乌加热醇提物用大孔树脂分离，收集乙醇洗脱部分，其主要成分为自首乌C21甾苷，经紫外分光光度法测定，其可测含量在65％左右。用白首乌提取物(extractofCynanchumauriculatum，EOCA)给小鼠连续灌胃24天。在灌胃第15天用反复脑缺血再灌注加尾静脉放血降压的方法建立VD小鼠模型。经Morris水迷宫实验证实，VD模型小鼠的学习记忆能力较假手术组显著降低。白首乌提取物组小鼠较模型组小鼠的学习记忆能力得到显著改善。 进一步的研究表明，白首提取物主要从以下几个方面发挥对VD模型小鼠的保护作用：①减轻由造模引起的脑水肿程度。②降低脑内单胺氧化酶(monoamineoxidase，MAO)含量。③维持脑内乙酰胆碱酯酶(acetylcholineesterase，AchE)的活力。④降低脑内兴奋性递质谷氨酸的含量。⑤维持神经细胞正常数量和结构形态。⑥抑制脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-asparticacidreceptor,NMDAR)的过度表达，从而降低兴奋毒性作用导致神经元损伤。⑦提高小鼠的抗缺氧能力。⑧增强小鼠的抗氧化、清除自由基能力：增强小鼠脑内SOD活力，提高抗超氧阴离子能力和抑制羟自由基能力，降低脑内MDA含量和过氧化氢的含量。同时白首乌提取物还能提高小鼠远隔器官肝、肾的抗氧化酶系活性。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1研究背景

1.1.1血管性痴呆简介

1.1.2血管性痴呆动物模型简介

1.2白首乌介绍

1.2.1白首乌简介

1.2.2白首乌的成分

1.2.3白首乌的药理作用

1.2.4白首乌主要活性成分的毒理研究

1.3本课题研究的意义和主要内容

第二章白首乌有效成分的提取和血管性痴呆小鼠模型的建立

2.1引言

2.2实验材料

2.2.1原料、药材及实验动物

2.2.2实验试剂

2.2.3主要实验仪器

2.3实验方法

2.3.1实验用药的提取分离

2.3.2白首乌提取物中主要成分的含量测定

2.3.3白首乌提取物化学成分的初步定性实验

2.3.4血管性痴呆模型的制备

2.3.5造模后小鼠一般状态的观察

2.3.6造模后小鼠学习记忆能力的测定

2.3.7统计学处理

2.4结果与讨论

2.4.1白首乌提取物TLC定性分析

2.4.2白首乌提取物中主要成分的含量测定结果

2.4.3白首乌提取物化学成分初步分析

2.4.4小鼠一般状态的改变

2.4.5 Morris水迷宫测定结果

2.5本章小结

第三章白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠的药效药理研究

3.1引言

3.2实验材料与仪器

3.2.1实验材料

3.2.2主要实验仪器

3.3实验方法

3.3.1断头后张口喘气时间的测定

3.3.2脑指数的测定

3.3.3脑组织匀浆的制备

3.3.4脑匀浆总蛋白含量测定

3.3.5脑匀浆单胺氧化酶含量的测定

3.3.6脑匀浆乙酰胆碱酯酶含量的测定

3.3.7脑匀浆谷氨酸含量的测定

3.3.8脑组织病理学形态的改变

3.3.9免疫组化法检测脑组织NMDAR的表达

3.3.10统计学处理

3.4结果与讨论

3.4.1白首乌提取物对小鼠断头后张口喘气时间影响

3.4.2白首乌提取物对小鼠脑指数的影响

3.4.3白首乌提取物对小鼠脑匀浆单胺氧化酶含量的影响

3.4.4白首乌提物对小鼠脑匀浆乙酰胆碱酯酶含量的影响

3.4.5白首乌提取物对小鼠脑匀浆谷氨酸含量的影响

3.4.6白首乌提取物对小鼠脑组织病理形态的影响

3.4.7白首乌提物对小鼠脑组织NMDAR表达的影响

3.5本章小结

第四章白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠脑组织抗氧化水平的影响

4.1引言

4.2实验材料与仪器

4.2.1实验材料

4.2.2主要实验仪器

4.3实验方法

4.3.1脑组织匀浆的制备

4.3.2脑匀浆总蛋白含量测定

4.3.3脑匀浆SOD活力和MDA含量的测定

4.3.4脑匀浆抗超氧阴离子自由基能力的测定

4.3.5脑匀浆抑制羟自由基能力的测定

4.3.6脑匀浆过氧化氢含量的测定

4.3.7统计学处理

4.4结果与讨论

4.4.1小鼠脑匀浆SOD活力和MDA含量的测定结果

4.4.2小鼠脑匀浆抗超氧阴离子自由基能力的测定结果

4.4.3小鼠脑匀浆抑制羟自由基能力的测定结果

4.4.4小鼠脑匀浆过氧化氢含量的测定结果

4.5本章小结

第五章白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠远隔器官的影响

5.1引言

5.2实验材料与仪器

5.2.1实验材料

5.2.2主要实验仪器

5.3实验方法

5.3.1组织匀浆的制备

5.3.2组织匀浆总蛋白含量的测定

5.3.3肝匀浆和肾匀浆SOD活力和MDA含量的测定

5.3.4肝、肾、心、肺组织病理学检查

5.3.5统计学处理

5.4结果与讨论

5.4.1肝、肾匀浆SOD活力和MDA含量测定结果

5.4.2肝组织病理切片观察

5.4.3肾组织病理切片观察

5.4.4心组织病理切片观察

5.4.5肺组织病理切片观察

5.5本章小结

结论及展望

致谢

参考文献

附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文