白喉毒素/IL-2融合蛋白的基因构建及其表达、纯化的研究

摘要

我们构建了DT<,389>-IL-2重组嵌合毒素,它保留了白喉毒素N端的389个氨基酸(跨膜区和酶活性区),用人全长IL-2替换了白喉毒素受体结合区.依赖于白喉毒素蛋白分子结构上的特点,重组嵌合毒素DT<,389>-IL-2包括三个有活性的功能区,即白喉毒素酶活性区、跨膜区及人IL-2.其作用机制是分子中的IL-2与细胞表面的IL-2受体特异性结合,形成受体配体复合物,然后通过跨膜区结构的改变来介导毒素内化,内化后的毒素蛋白分子,在胞内酸性环境的作用下发生断裂,释放白喉毒素酶活性区至胞浆中发挥毒性作用,从而特异性地杀灭IL-2高表达的肿瘤细胞.

目录

前言

第一部分pET-3a/DT389-IL-2重组质粒的构建与表达

第二部分工程菌发酵及目的蛋白纯化

综述一融合蛋白基因工程

综述二蛋白质的色谱分离

参考文献

致谢