影响SW480细胞中肠干细胞特异性标记物Musashi-1表达的研究

摘要

目的：研究肠道干细胞特异性标记物Musashi-1在SW480结直肠癌细胞株中表达的影响因素，并初步探讨其中的机制。 方法：MTT法研究5-FU、奥沙利铂及顺铂对sW480细胞体外生长的抑制作用。流式细胞仪技术检测SP细胞比例及CD34<'+>CD44<'+>细胞比例；免疫细胞化学方法检测BrdU(5-溴-2脱氧尿嘧啶核苷)标记情况以及细胞内M1asashi-1表达的定位；半定量RT-PCR方法和Westem-Blot方法检测肠道干细胞特异性标记Musashi-1mR2NA和蛋白的表达。连续三次体外克隆形成试验培养SW480细胞获得高成瘤性的肿瘤细胞并扩增不同代数。 结果：5-FU不同作用时间(24、48、72h)的半数抑制浓度分别为32.12、16.2和6.8 mg/l，SP细胞比例、CDD34<'+>CD44<'+>细胞以及Musashi-1 mRNA和蛋白表达在5-Fu作用后均增加(P<0.05)。奥沙利铂、顺铂作用48h的半数抑制浓度分别为8.02和6.2 mg/l，同时Musashi-1 mRNA表达增加(P<0.05)。随着克隆形成试验进行，克隆形成率呈增加；克隆形成试验获得的第一代与第二代细胞中SP细胞比例、BrdU滞留试验的BrdU阳性率以及.Musashi-1的RNA和蛋白表达均高于未处理的SW480细胞(P<0.05)，而第四代细胞的各项检测结果与原细胞株相比无增高(P>0.05)；免疫细胞化学将Musashi-1蛋白定位胞浆内。 结论：5-FU、奥沙利铂及顺铂等化疗药物增加正常肠干细胞标记物Mlsashi-1的表达，而克隆形成细胞的扩增则降低其表达。Musashi-1有可能成为结直肠癌中干细胞样肿瘤细胞特异性标记，CD34、CD44可能具有类似的潜力。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要缩略语

声明

前言

第一章综述：肿瘤干细胞的研究进展

第二章实验材料、方法及结果 第一部分

第三章实验材料、方法及结果 第二部分

第四章讨论

结论

参考文献

致谢

作者简介