冷冻联合多西紫杉醇对激素非依赖性前列腺癌细胞(PC3)的体外作用

摘要

目的：观察冷冻（Cryotherapy，Cryo）、多西紫杉醇（Docetaxol，DT）及冷冻联合多西紫杉醇对前列腺癌细胞PC3生长、增殖和抑制作用、细胞周期的影响。
　　 方法：体外培养前列腺癌PC3细胞，应用光镜、透射电镜、四甲基噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察1umol/L、0.1umol/L、0.01umol/L多西紫杉醇和-20℃Cryo、-40℃Cryo在体外单一或协同对前列腺癌细胞系PC3的生长、凋亡诱导、细胞DNA含量及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。
　　 结果：冷冻和多西紫杉醇能引起PC3细胞产生凋亡形态学改变。MTT试验观察到自0.01μ mol/L～1μ mol/L，DT对PC3细胞存活和生长抑制作用逐渐增强，从32.10％～55.4％（P<0.05），呈浓度依赖性。-20℃至-40℃，Cryo对PC3细胞存活和生长抑制作用逐渐增强，从70.2％～80.5％（P<0.05），呈温度依赖性。-20℃恒定条件下，DT浓度自0.01μ mol/L-1μmol/L，对PC3细胞的存活和生长抑制作用增强，从76.9％～89.3％（P<0.05），呈温度与浓度依赖性。流式细胞术结果显示经0.01μ mol/L～1μmol/L DT作用48小时后，G0/G1期细胞比例逐渐下降，分别为36.3％、22.0％、17.5％；而G2/M期细胞比例逐渐升高，分别为52.1％，69.9％，71.9％。-20℃至-40℃，G0/G1期细胞比例分别为28.1％、23.6％，比例逐渐下降，G2/M期细胞比例逐渐升高，分别为52.9％，65.8％，呈温度依赖关系。在-20℃恒定条件下，DT浓度自0.01μmol/L～1μ mol/L，G0/G1期细胞比例逐渐下降，分别为25.9％、22.2％、11.0％；而G2/M期细胞比例逐渐升高，分别为62.9％，70.9％，81.0％。冷冻+化疗具有G2/M期阻滞作用，呈温度及剂量依赖关系。免疫组化结果显示多西紫杉醇药物浓度自0.01μmol/L～1μ mol/L，Bcl-2蛋白表达降低从0.19％～0.09％，Bax蛋白表达增强从0.15％～0.29％，从-20℃至-40℃，Bcl-2蛋白表达降低从0.13％～0.11％，Bax蛋白表达增强从0.21％～0.30％（P<0.05）。-20℃恒定条件下，DT浓度自0.01μmol/L～1μ mol/L，Bcl-2蛋白表达降低从0.10％～0.05％，Bax蛋白表达增强从0.31％～0.3596。
　　 结论：冷冻联合多西紫杉醇能够协同抑制PC3细胞体外生长、增殖能力，促进细胞的凋亡，抑制肿瘤细胞周期进展。

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