一、热休克蛋白在前列腺炎患者精浆中的表达及其临床意义二、姜黄素对雄激素依赖性及雄激素非依赖性前列腺癌细胞的诱导凋亡作用

摘要

本研究分为二部分：
　　 第一部分、热休克蛋白在前列腺炎患者精浆中的表达及其临床意义
　　 目的：探讨慢性细菌性前列腺炎以及慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合症(CP/CPPS)患者精浆中热休克蛋白70 (HSP70)的表达及临床意义。
　　 方法：采用酶联免疫吸附测定法( ELISA)对16例慢性细菌性前列腺炎（Ⅱ型）、23例炎症型慢性非细菌性前列腺炎即炎症型慢性骨盆疼痛综合征（ⅢA型）、26例非炎症型慢性非细菌性前列腺炎即非炎症型慢性骨盆疼痛综合征（ⅢB型）患者及15例健康志愿者精浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-a,)、白细胞介素1β (IL-1β)以及HSP70含量进行测定分析，并将HSP70的表达与慢性前列腺炎症状评分（修订版）进行相关性研究。
　　 结果：慢性细菌性前列腺炎患者精浆中细胞因子（TNF-a、IL-1β）以及HSP70含量明显高于CP/CPPS患者及正常对照组。CP/CPPSⅢA型患者精浆中IL-1β的表达明显高于CP/CPPSⅢB型患者及正常对照组。CP/CPPS患者精浆中HSP70的表达明显低于正常对照组。慢性细菌性前列腺炎患者精浆中HSP70的表达与CPSI评分呈显著负相关。
　　 结论：精浆中HSP70的表达能够作为评价慢性细菌性前列腺炎病情程度的分子生物学指标。IL-1β能够作为CP/CPP分型诊断指标。对于慢性细菌性前列腺炎患者，HSP70具有细胞保护功能。CP/CPPS患者精浆中HSP70表达的抑制可能与T细胞功能受损有关。
　　 第二部分、姜黄素对雄激素依赖性及雄激素非依赖性前列腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制
　　 目的：探讨姜黄素对雄激素依赖性( LNCaP)及雄激素非依赖性(PC3)前列腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。
　　 方法：分别用0、10、25、50、75、100 μmol/L浓度的姜黄素对LNCaP及PC3前列腺癌细胞株进行体外干预，5、12、24 h后四氮甲唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长活性；24 h后透射电镜观察细胞超微结构变化，流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期的变化；Sh后Westem印迹法检测细胞内IkBa以及c-Jun的表达。
　　 结果：姜黄素显著抑制LNCaP及PC3细胞的体外生长，呈剂量和时间依赖性，不同浓度姜黄素组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(p均<0.01)；姜黄素作用24 h后LNCaP及PC3细胞均出现细胞凋亡的形态学改变；各浓度姜黄素组作用LNCaP及PC3细胞后，凋亡细胞比例均显著高于空白对照组（p均<0.05），差异有显著性意义；姜黄素诱导LNCaP及PC3细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞（p均<0.01）；LNCaP细胞中IKBa的表达明显高于PC-3细胞（P0.05）；但作用于PC3细胞后，细胞中IkBa的表达明显增强，呈现出显著的剂量依赖性(P　　 结论：姜黄素通过诱导LNCaP及PC3细胞的凋亡从而完成抑制前列腺癌细胞体外生长的作用。NF-κB在两种前列腺癌细胞中表达的不同可能导致其不同的生物学效应，由此可将其作为前列腺癌的分型诊断指标。姜黄素通过抑制NF-κB以及c-Jun在PC3细胞中的表达发挥诱导PC3细胞凋亡的作用。对于LNCaP细胞，姜黄素通过抑制c-Jun表达从而发挥诱导细胞凋亡的作用，NF-κB信号通路未被影响。