甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠S-100蛋白影响的研究

摘要

目的：深低温停循环和深低温低流量方法在心脏外科得到广泛应用，但其暂时或永久的神经系统并发症却高达4﹪～25﹪(平均8﹪)，而且安全时限在45～60分钟，限制了该方法的临床应用。近年来研究显示这些迟发性的神经系统并发症与脑缺血再灌注损伤有关。本研究采用深低温脑缺血再灌注大鼠模型，应用酶联免疫吸附检测技术(ELISA)、HE染色、免疫组化(SABC)和RT-PCR技术分别观察甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠S-100蛋白的影响。 方法：第一部分深低温脑缺血再灌注大鼠模型的建立：将健康SD大鼠麻醉后用冰袋包埋降温至(21±1)℃，阻断双侧颈总动脉，记录体温、心率、血压、血氧饱和度并做血气分析，60分钟后恢复颈总动脉血流，并行复温至复苏。 第二部分甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠血清S-100蛋白影响的研究：将SD大鼠，随机分为3组：假手术组、模型组、甲强龙处理组。模型组和甲强龙处理组(每组再分为缺血60min再灌注后2h、6h、12h、1d、2d、3d、7d共7个小组)。建立深低温脑缺血再灌注大鼠模型后，用酶联免疫吸附技术定量检测不同时相点血清S-100β蛋白水平。 第三部分甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑S-100β蛋白表达影响的研究：用免疫组织化学技术检测脑缺血再灌注大鼠各时间点脑组织中S-100β蛋白的动态变化。 第四部分甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑S-100mRNA表达的影响：用RT-PCR技术观察大鼠脑皮层组织S-100mRNA的动态变化及MP对其表达的影响。 用SPSS12.0统计软件分析实验数据。 结果：(1)ELISA检测结果：假手术组血清S-100β为(0.24±0.02)ug/l，模型组和甲强龙处理组6h～2d血清S-100β蛋白水平均比假手术组高(P＜0.01)，甲强龙处理组血清S-100β蛋白水平比模型组低(P＜0.01)。 (2)免疫组化法检测结果：假手术组S-100β蛋白呈基础水平的表达。模型组和甲强龙处理组于深低温脑缺血再灌注后6h阳性细胞表达开始增加，1～2d逐渐达高峰，3～7d表达减弱。模型组脑组织S-100β蛋白表达水平与甲强龙处理组比较显著升高。 (3)大鼠脑皮层细胞S-100mRNA表达RT-PCR检测结果：假手术组S-100mRNA呈基础水平表达。甲强龙处理组S-100mRNA表达量与模型组相比显著降低。 结论：甲基强的松龙对鼠深低温脑缺血再灌注损伤有干预治疗作用。

目录

摘要

前言

第一部分：深低温脑缺血再灌注大鼠模型的建立

第二部分：甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠血清S-100蛋白的影响

第三部分：甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑皮层细胞S-100β蛋白表达的影响

第四部分：甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠S-100mRNA表达的影响

结语

参考文献

致谢

附录 在校期间参加会议及发表论文情况

综述 S-100蛋白与心脏手术脑损伤和脑保护

论文独创性声明及论文使用授权声明