晚期糖基化终产物受体特异性小干扰RNA对MMP-1和TIMP-1表达的影响

摘要

目的：探讨晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products，RAGE)特异性小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)对原代大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSCs)和肝纤维化(hepatic fibrosis，HF)大鼠肝脏中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1，MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)表达的影响。
　　方法：分离培养原代大鼠HSCs，将RAGE特异性siRNA表达载体pAKD-GR126转染入原代大鼠HSCs，以空白组和转染非特异性siRNA表达载体pAKD-NC组为对照，分别应用实时荧光定量PCR和Western-blot检测各组原代大鼠HSCs中RAGE、MMP-1和TIMP-1的mRNA及蛋白的表达;制备CCl4诱导的HF大鼠模型，将不同治疗剂量的pAKD-GR126经尾静脉导入成模后大鼠，以正常对照组(NC组)、模型组(FM组)和非特异性siRNA表达载体pAKD-NC组(NS组)为对照，分别应用PCR和Western-blot检测各组大鼠肝组织中RAGE、MMP-1和TIMP-1的mRNA及蛋白的表达。常规HE及Masson胶原染色，光镜下观察，比较各组肝组织形态学改变。
　　结果：转染pAKD-GR126的原代HSCs中，RAGE和TIMP-1的mRNA和蛋白的表达显著低于空白对照组和pAKD-NC组（P均＜0.05），MMP-1的mRNA和蛋白的表达显著高于空白对照组和pAKD-NC组（P均＜0.05）。动物试验中，与FM组相比，LT组、MT组、HT组的RAGE和TIMP-1的mRNA和蛋白表达均有不同程度的降低（P均＜0.05），MMP-1的mRNA和蛋白表达均有不同程度的增加（P均＜0.05），且与pAKD-GR126呈剂量依赖关系。光镜下观察，LT组、MT组和HT组纤维化程度较FM组和NS组相比，均有不同程度的减轻，且以HT组减轻最明显。
　　结论：RAGE特异性siRNA在原代大鼠HSCs和HF大鼠体内均能抑制RAGE和TIMP-1的表达，并促进MMP-1的表达，使大鼠肝脏HF的程度减轻。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

文献综述

第一部分 材料与方法

1 材料

2 实验方法

第二部分 实验结果

1．RAGE特异性siRNA对原代HSCs RAGE、MMP-1、TIMP-1表达的影响

2．特异性siRNA对HF大鼠肝脏中MMP-1和TIMP-1的表达的影响

第三部分 讨论

第四部分 结论

参考文献

致谢

作者简介