CD137L介导的逆向信号对非小细胞肺癌细胞株生物学作用的初步研究

摘要

背景: 肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，具有很高的发病率和死亡率，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是其中最常见的组织类型。CD137L配体(CD137 Ligand，CD137L)是一种重要的共刺激分子，与其受体CD137结合后既可以传递正向信号，也可以传递逆向信号。新的研究发现，CD137L在NSCLC组织中存在不同程度的表达，可能参与NSCLC的发生发展。 目的: 检测CD137L在NSCLC细胞株上的表达情况。探索其介导的逆向信号对细胞的生物学作用。 材料与方法: 1、通过流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）检测CD137L在NSCLC细胞A2、A549、H1650、H1975及PC9上的表达。蛋白质印迹法(Western Blot)进一步验证上述结果。 2、用CD137-Fc重组蛋白激活CD137L介导的逆向信号通路。IgG-Fc作为同型对照。 3、细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK8）检测CD137L介导的逆向信号对H1650及PC9细胞增殖的作用。 4、FCM检测CD137L介导的逆向信号对H1650及PC9细胞凋亡的作用。 5、Western Blot检测经CD137-Fc激活后H1650及PC9中凋亡执行蛋白cleaved caspase3的表达。 结果: 1、在细胞株的胞膜上，CD137L在H1650上呈高表达，A2呈较低表达，A549、H1975、PC9呈低表达。在细胞株的胞质内，CD137L在五种细胞中均有较高程度的表达。而Western Blot提示CD137L只在H1650中有明确的表达。 2、CD137L介导的逆向信号能抑制高表达CD137L的H1650细胞增殖，对低表达CD137L的PC9细胞无明显作用。 3、CD137L介导的逆向信号能促进高表达CD137L的H1650细胞凋亡，对低表达CD137L的PC9细胞无明显作用。 结论: CD137L在NSCLC细胞株上有不同程度的表达，对于高表达CD137L的细胞株，其介导的逆向信号可以抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。CD137L可能在NSCLC的发生发展中起到一定的作用。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

一、实验仪器、耗材及试剂

二、实验方法

三、统计学方法

结果

一、CD137L在NSCLC细胞株的表达情况

二、CD137L介导的逆向信号对NSCLC细胞株增殖及凋亡的影响

讨论

小结

参考文献

综述 非小细胞肺癌免疫治疗研究进展

在读期间发表文章情况

致谢