骨髓增殖性肿瘤及骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤的分子生物学特征

摘要

本文对骨髓增殖性肿瘤及骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤的分子生物学特征进行了研究。本研究分为两个部分：
　　第一部分：真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化患者CALR、 JAK2及MPL基因突变分析。
　　目的：探讨真性红细胞增多症(PV)和原发性骨髓纤维化(PMF)患者CALR、JAK2及MPL基因突变情况及临床特征。
　　方法：选取2009年1月至2014年1月于江苏省人民医院就诊的PV患者48例，PMF患者33例。采用PCR扩增产物直接测序法检测患者骨髓或外周血CALR、JAK2 V617F、JAK2外显子12和MPL W515L/K基因突变的发生情况及临床特征。
　　结果：48例PV患者中，JAK2 V617F突变阳性患者占81.3％(39/48)，JAK2 V617F突变阴性患者占18.7％(9/48)，未检测到JAK2 exon12突变;33例PMF患者中，CALR突变阳性患者占12.1％(4/33)，JAK2 V617F突变阳性患者占60.6％(20/33)，未检测到MPLW515L/K突变，JAK2 V617F、MPL W515L/K和CALR突变均阴性患者占27.3％(9/33)，并且这三种突变不同时出现。在PV患者中，JAK2 V617F突变阳性患者的白细胞(WBC)和血小板(Plt)计数均高于JAK2V617F野生型患者，而血红蛋白(HGB)浓度低于JAK2 V617F野生型患者(P＜0.05);在PMF患者中，JAK2 V617F突变阳性患者血红蛋白浓度高于CALR突变阳性患者（P＜0.05）。
　　结论：在BCR-ABL阴性MPN的患者中，CALR突变阳性患者与JAK2 V617F突变阳性患者相比，骨髓增殖水平、发生血管事件风险和危险分层更低，提示有较好的预后，但其致病机制还有待于进一步研究。
　　第二部分：CSF3R、 SRSF2和SETBP1基因在慢性中性粒细胞白血病和慢性粒单核细胞白血病中的突变情况和临床意义。
　　目的：为探讨CSF3R、SETBP1和SRSF2基因在慢性中性粒细胞白血病(CNL)和慢性粒单核细胞白血病(CMML)患者中的突变情况以及这些突变与临床特征的关系。
　　方法：对10例CNL患者和56例CMML患者的CSF3R外显子14-17、SETBP1和SRSF2基因进行了测序，并且对其临床特征进行了研究。
　　结果：10例患者CNL中，8例(80％)的患者伴随CSF3R突变，其中7例为CSF3R T618I。两名患者伴随CSF3R复合突变（T618I/W818X和T618I/Q749X），其中一名(T618I/Q749X)同时合并SETBP1 D874N。在56例患者CMML中，14例(25％)患者伴随SRSF2突变，4例(7.1％)伴随CSF3R突变，3例(5.3％)伴随SETBP1突变。在CMML患者中，与SRSF2野生型患者相比，SRSF2突变阳性患者可能具有更多的SETBP1突变[1/14(7.1％)vs.2/42(4.8％)，P＞0.05];和较少CSF3R突变[0/14(0％)vs.4/42（9.5％)，P＜0.001]。SRSF2突变型和SRSF2野生型患者的临床特征，如年龄、性别、WHO分型、FAB分型、染色体核型危险分层及血细胞计数的比较无显著差异（P＞0.05）。SRSF2突变型比SRSF2野生型患者具有更短的无疾病进展生存时间和总生存时间(P＜0.001);SETBP1突变型比SETBP1野生型患者具有更短的无疾病进展生存时间和总生存时间(P=0.02和P＜0.001)。然而，CSF3R突变型和野生型患者之间无进展生存时间和总生存时间无显著差异。在多因素生存分析中，SRSF2突变患者的总生存时间(P=0.028; HR=3.307(95％CI:1.137-9.614))和无疾病进展生存时间(P=0.001;RR=15.431(95％CI:3.041-78.312))是独立不良预后因素;SETBP1突变是总生存时间的独立不良预后因素(P=0.034; RR=9.492(95％CI:1.183-76.128))。
　　结论：大多数CNL患者存在CSF3R突变，且CSF3R T618I突变是高度敏感和特异的分子标记。SRSF2突变在CMML中常见同时具有不良的预后意义。SETBP1做为一个非特异性的分子标记，可见于CNL、CMML及其他血液肿瘤中，也具有不良的预后意义。

目录

声明

第一部分 真性红细胞增多症和原发性骨髓纤维化患者CALR、JAK2及MPL基因突变分析

摘要

前言

材料与方法

1．病例来源

2．主要试剂与仪器

3．实验步骤

4．收集临床资料及随访

5．统计学处理

结果

讨论

参考文献

第二部分 CSF3R、SRSF2和SETBP1基因在慢性中性粒细胞白血病和慢性粒单核细胞白血病中的突变情况和临床意义

摘要

前言

材料与方法

1．研究对象

2．主要试剂与仪器

3．实验步骤

4．收集临床资料及随访

5．统计学处理

结果

讨论

参考文献

文献综述 骨髓增殖性肿瘤的分子生物学研究新进展

附录

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