(S)-甘油-单亚油酸盐通过阻碍NF-кB信号的激活抑制炎症基因表达的研究

摘要

目的:研究亚油酸(LA)的衍生物(S)-甘油-单亚油酸盐(脂肪酸甘油，FAG)通过阻碍核因子-B(NF-B)信号的激活，抑制可诱导的一氧化氮合酶(iNOS)依赖性一氧化氮(NO)的形成及炎症基因表达的作用。
　　方法: RAW264.7巨噬细胞经 FAG处理后，利用 Griess反应法检测了 NO的产生量,采用蛋白质印迹免疫分析法和实时定量 RT-PCR及酶联免疫吸附实验测定了 iNOS和炎性细胞因子的mRNA与蛋白质表达水平。另外，为了检测 FAG对 NF-KB转录和 IB的磷酸化及降解，利用了蛋白质印迹免疫分析法。采用荧光素酶检测法和凝胶迁移率实验评价了 FAG对 NF-KB信号激活的影响。
　　结果:与经脂多糖(LPS)刺激的阴性对照组相比，经 FAG处理的实验组 N O产生量明显减少；iNOS和促炎性细胞因子白介素(IL)-1K、I L-6的表达明显减少；而肿瘤坏死因子(TNF)-KB的表达无差异。另外，FAG可以阻碍 IB的磷酸化、泛素化以及 NF-KB的转录。与阴性对照组相比，经 FAG处理的实验组 NF-KB转录活性明显降低。FAG还可以抑制特定 NF-KB的DNA结合活性。
　　结论: FAG在用 LPS刺激后的RAW264.7巨噬细胞中，可以通过阻碍 NF-KB信号的激活抑制 iNOS特定的NO产物、ROS的产生以及炎症基因表达。

目录

声明

英文缩略语(Abbreviation)

第一章 前言

第二章 实验材料

2.1 实验仪器

2.2 实验试剂盒

2.3 实验试剂

2.4 实验药品

2.5 实验细胞

第三章 实验方法

3.1 实验方法

3.2 统计学处理

第四章 结 果

4.1 FAG的化学结构

4.2 FAG的细胞的毒性作用

4.3 FAG对ROS形成的抑制作用

4.3 FAG对iNOS基因和蛋白质表达及产生NO的抑制作用

4.4 FAG对炎症细胞因子基因及蛋白质表达的抑制作用

4.5 FAG对炎症介质激活的抑制作用

4.6 FAG对NF-κB核内转录和IκBα磷酸化及降解的抑制作用

4.7 FAG对NF-κB信号激活的抑制作用

第五章 讨论

5.1 FAG对ROS形成的影响

5.2 FAG对iNOS表达及NO产物的影响

5.3 FAG对炎症因子和炎症介质的影响

5.4 FAG对转录因子NF-B信号激活的影响

结论

参考文献

致谢