柱前手性荧光衍生化高效液相色谱法分离去甲乌药碱对映体

摘要

药物对映体之间由于其空间结构的差异，导致药理、药效上有很大的不同。因此，对这些对映体的拆分分析具有非常重要的意义。消旋体在天然化合物中也普遍存在，遗憾的是目前对这些天然化合物对映体缺乏系统而深入的生物活性研究和毒理学研究。为了达到此研究目的急需建立天然化合物对映体的分析的方法。
　　去甲乌药碱是中药附子、莲子心、北细辛、买麻藤的一种有效成分。本论文建立了以R(-)/S(+)-4-(N,N-dimethylaminosulfonyl)-7-(3-isothiocy-anatopyrrolidino)-2,1,3-benzoxadiazole[R-(-)/S-(+)-DBD-PyNCS]为手性荧光衍生化试剂与去甲乌药碱对映体进行衍生化反应的高灵敏方法。与去甲乌药碱对映体的衍生化反应条件温和（碱性介质为3％的吡啶条件下60℃反应60 min），生成具有荧光特性的去甲乌药碱非对映体衍生物在荧光检测器下进行检测，荧光检测波长：λex=450 nm，λem=550 nm。去甲乌药碱非对映体衍生物以流动相为乙腈-甲醇-水（v\v\v25:20:55）其中含有0.2%的甲酸溶液，在色谱柱UltimateXB-C18(3μm,150 mm×4.6 mmi.d.)成功地得到了拆分，其分离度(Rs)可达到1.52。R-(+)/S-(-)-去甲乌药碱对映体在0.2–400μg/ml时成良好的线性，最低检测限（S/N=3）为20 ng/ml。利用所建立的分离分析方法成功地对实际样品中药莲子心中R-去甲乌药碱的含量进行了测定。

目录

声明

前言

第一章 手性荧光衍生化RP-HPLC建立分离分析去甲乌药碱对映体方法

1.1引 言

1.2实验部分

1.2.1仪器与试剂

1.2.2标准液的配制

1.2.3 衍生化反应

1.2.4 色谱条件

1.2.5质谱条件

1.3 结果与讨论

1.3.1 衍生化反应条件

1.3.2色谱条件的优化

1.3.3 去甲乌药碱分离色谱图

1.3.4 实验方法的验证

1.4本章小结

第二章 中药莲子心中去甲乌药碱对映体的测定

2.1引 言

2.2实验部分

2.2.1仪器与试剂

2.2.2标准液的配制

2.2.3 衍生化反应

2.2.4 样品前处理

2.2.5 色谱条件

2.3 结果与讨论

2.3.1 莲子心中去甲乌药碱对映体类型的确定

2.3.2线性关系和检出限

2.3.3精密度和稳定性

2.3.4 样品中去甲乌药碱对映体含量的测定

2.3.5回收率试验

2.4 本章小结

结论

文献综述:手性药物分离的研究进展

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文