不同培养因素对犬IVM卵母细胞形态和发育能力的影响

摘要

本试验采用组织学、组织化学、电子显微镜及细胞培养技术，在观察体内犬卵母细胞发育形态学特点的基础上，进行体外犬卵母细胞发育形态学的比较性研究，探讨促黄体素、培养温度、pH值等对犬卵母细胞的体外成熟的影响，结果如下：
　　1、无卵泡和黄体的犬卵巢呈长卵圆形或蚕豆状，生殖上皮为立方上皮，原始卵泡单个或三五成群，次级卵泡未见典型的放射冠，三级卵泡可见明显卵丘形成；透明带出现于初级卵泡的后期。
　　2、未培养的卵母细胞，脂质分布均匀、密集，着色较深，随成熟培养卵母细胞内脂滴稀松，着色变浅；卵母细胞脂滴直径随培养时间先增后小，在培养48h时达高峰。
　　3、体外成熟培养液中适量添加 FSH、LH、E2能显著提高犬卵母细胞的成熟率，不同季节、温度、PH值对卵母细胞的成熟率均有明显影响。
　　4、体外成熟犬卵母细胞在各个发育阶段均有线粒体、脂滴、空泡存在，体外成熟24h细胞内线粒体多以帽状为主，72h时呈棒状，而高尔基体和内质网随培养时间的延长出现退化现象。
　　本研究结果将为建立和完善犬卵母细胞体外成熟的培养体系，提供形态学理论依据和确实可靠的试验依据。

目录

声明

英文缩略语对照表

前言

1 哺乳动物卵巢的形态学研究

2 动物卵母细胞体外成熟的研究现状

3 本课题研究的目的和意义

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 卵巢的解剖学特征和卵巢体积、重量

2 犬卵巢的一般形态结构

3 犬卵巢中卵泡发育的组织学特点

4.犬卵泡闭锁的显微结构

5 体外成熟培养不同时间犬卵母细胞内脂质变化

6 犬卵母细胞体外成熟培养不同时间透明带厚度的变化

7 季节对犬卵母细胞体外成熟影响

8 温度对犬卵母细胞体外成熟影响

9 添加不同浓度LH对犬卵母细胞体外成熟影响

10 不同pH值对犬卵母细胞体外成熟影响

11 不同浓度E2对犬卵母细胞体外成熟的影响

12 犬卵母细胞透射电镜观察结果

讨论

1 犬发情季节和非发情季节的卵巢重量和体积的变化

2 犬卵泡发育的组织学特点

3 成熟培养的犬卵母细胞的透明带厚度变化

4犬卵母细胞脂滴变化

5 季节对卵母细胞体外成熟影响

6 温度对卵母细胞体外成熟影响

7添加不同浓度LH对对卵母细胞体外成熟影响

8不同浓度雌二醇对卵母细胞体外成熟影响

9犬卵母细胞的超微结构

结论

参考文献

致谢

作者简介