用聚合酶链反应(PCR)法病因诊断慢性结膜炎的研究

摘要

目的：对慢性结膜炎患者结膜囊内分泌物进行DNA提取并加入细菌及腺病毒特异性引物，通过PCR扩增，探讨PCR检测应用于慢性结膜炎病因诊断中的临床意义。
　　方法：选择慢性感染性结膜炎患者36人（36眼），慢性免疫性结膜炎患者24人（24眼），正常人22人（22眼），两眼共患结膜炎者取较重的一侧。所有受试者结膜囊分泌物提取的DNA分成两部分，分别加入细菌引物及腺病毒引物进行两次PCR扩增，凝胶电泳后在凝胶成像分析系统中观察结果。对于第一组检测人群同时进行结膜囊细菌培养观察结果。
　　结果：1.慢性感染性结膜炎组（Ⅰ）有14眼扩增出520bp大小条带，阳性率38.89％；4眼扩增出1004bp条带，阳性率11.11%，两者比较有显著性差异（χ2=7.40，P<0.05）；2.慢性免疫性结膜炎组（Ⅱ）有3眼扩增出520bp大小条带，阳性率12.5%；1眼扩增出1004bp条带，阳性率4.13%。3.慢性感染性结膜炎组（Ⅰ）细菌培养法有19眼培养出阳性，阳性率为52.78%与PCR检测法比较无显著性差异（χ2=3.2，P﹥0.05）。
　　结论：1.慢性感染性结膜炎检测细菌感染多于腺病毒感染。2.部分慢性免疫性结膜炎患者可能对细菌或病毒成分或产物致敏，或者检测出细菌为存在于结膜囊内的正常菌群。3.虽然PCR检测法阳性检出率较细菌培养法无明显差异，但对样本要求不高，且经济又时间短，对慢性结膜炎诊断具有良好的应用前景，是一种可供选择的方法。

目录

声明

第一章 前 言

第二章 材料与方法

2.1实验材料

2.1.1实验对象

2.1.2 试剂与材料

2.1.3 实验设备

2.2 实验方法

2.2.1 实验设计流程图

2.2.2样本及临床资料采集

2.2.3提取分泌物基因组DNA

2.2.4 DNA浓度测定

2.2.5 PCR体外扩增目的基因片段

2.2.6 1%琼脂糖电泳检测PCR扩增产物

2.3 统计学处理

第三章 结 果

3.1 慢性感染性结膜炎组(Ⅰ)细菌PCR检测与病毒PCR检测结果比较

3.2慢性免疫性结膜炎组(Ⅱ) PCR扩增结果

3.3正常组（Ⅲ）PCR扩增结果

3.4 慢性感染性结膜炎组(Ⅰ)细菌 PCR 检测与细菌培养结果比较

第四章 讨 论

第五章 结 论

参考文献

致谢

综述:PCR技术研究及其在眼科疾病诊断中的应用