五引物单管聚合酶链反应(PCR)扩增法快速测定人CYP2D6*10等位基因的类型

摘要

以人CYP2D6*10等位基因位点为研究对象,建立了一种由5条引物同时PCR扩增在单管中进行等位基因快速检测的新方法.该方法在等位基因特异性扩增法的基础上,在内引物3′端引入了一个人工错配碱基并在5′端附加一段"尾巴"作为引物的锚定部分,使扩增反应的特异性得到了提高.本实验所建立的方法可在单管中同时完成SNP 3种可能等位基因类型的快速检测.实测了47份样品的CYP2D6*10等位基因的类型,并随机对其中20份样品的测定结果用RFLP法进行了验证,结果完全一致.结果表明本法简便、快速,结果准确.