过度内质网应激在大鼠慢性环孢素A肾毒性模型细胞凋亡中的作用机制

摘要

目的：探讨过度内质网应激在大鼠慢性环孢素A（Cy-closporine A，CsA）肾毒性模型细胞凋亡中的作用机制。
　　方法：将Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为正常对照组和慢性CsA肾毒性组，分别给予皮下注射橄榄油（1mL/kg/d，对照组）和CsA（15mg/kg/d，毒性组）1周及4周后处死大鼠。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（TUNEL染色法）及 Masson染色评估肾小管间质纤维化和细胞凋亡；使用免疫组化学染色和免疫印迹依次检测分子免疫球蛋白结合蛋白（Bip）、磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α（elF2α）、生长抑制DNA损伤基因153（GADD153）、细胞凋亡相关基因caspase-12及caspase-3蛋白表达。
　　结果：与对照组比较，CsA注射1周观察不到肾小管间质纤维化和TUNEL阳性细胞，而给予 CsA注射4周大鼠表现为明显的肾小管间质纤维化[(38.9±3.3)％vs.(0.0±0.0)%，P<0.01]和大量 TUNEL阳性细胞[(89±9)% vs.(7±2)%，P<0.01]。在分子水平上，与对照组比较，CsA注射组Bip和caspase-12蛋白的表达1周达到高峰，4周后降至正常水平；反之，elF2α、GADD153、caspase-3蛋白表达呈时间依赖性的增加。
　　结论：在慢性CsA肾毒性中，过度的内质网应激耗尽Bip,凋亡前途径中elF2α、GADD153、caspase-12，caspase-3的激活导致肾小管上皮细胞凋亡参与肾小管间质损伤。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

第一章 材料与方法

1.1 动物与分组

1.2 肾脏病理

1.3 免疫组织化学染色

1.4 免疫印迹

1.5 统计学方法

第二章 结 果

2.1慢性CsA肾毒性肾脏病理变化

2.2 内质网应激分子伴侣Bip的蛋白表达

2.3 eIF2α蛋白的表达

2.4 细胞凋亡相关基因的表达

第三章讨 论

第四章结 论

附图

参考文献

致谢

综述:内质网应激在肾脏疾病中的研究进展