诱导子对反应器培养的西洋参不定根中皂苷及多糖积累的影响

摘要

西洋参为五加科人参属多年生药用草本植物，具有很高的药用价值。然而近些年来由于大量开发利用，其野生资源几近枯竭，人工栽培又面临周期长、占用大面积林地和耕地以及有效成份含量不稳定等问题，使得西洋参资源的开发和利用受到了严重的阻碍。因此，本研究以反应器培养的西洋参不定根为材料，研究几种诱导子对生物反应器培养的不定根有效物质积累的影响，旨在从西洋参反应器培养的不定根中获得大量的有效物质，用不定根代替野生或栽培西洋参作为医药产品、保健品的原材料及食品、化妆品的添加剂。同时，利用组织化学的方法，探明不定根中皂苷及多糖的分布情况，为西洋参不定根培养研究提供理论依据。
　　通过研究几种影响不定根生长的因素，发现5 mg·L-1的IBA，1.25 mM的PO43-以及3/4原MS配方浓度的有机物浓度对不定根的生长最有利。利用反应器对西洋参分别进行细胞和不定根培养，同时对细胞和不定根进行共培养的结果，反应器中培养物的生物量及皂苷积累量以不定根培养最佳。
　　利用人参病原菌，锈腐病和黑斑病作为真菌诱导子对反应器培养30 d的西洋参不定根进行不同天数的处理，结果发现处理8d时最有利于皂苷的积累。两种真菌诱导子中黑斑病诱导子的效果好于锈腐病诱导子，在黑斑病浓度为4 mg·L-1处理中不定根中皂苷含量最高，为未处理的3.15倍，皂苷生产量达到274.0 mg·L-1。对于多糖的积累，锈腐病和黑斑病真菌诱导子无促进效果，但茉莉酸甲酯（MeJA）对多糖积累的效果显著，浓度为175μmol·L-1时的处理效果最显著，不定根中多糖含量为未处理的2.43倍，多糖产量达到2.34 g·L-1。
　　利用组织化学的方法，对不定根中皂苷及多糖进行组织化学定位的结果，发现在未进行诱导子处理时，皂苷在不定根中主要积累于中柱细胞，只有少量存在于表皮中；利用黑斑病诱导子处理后，皂苷分布量显著增多，除了中柱和表皮细胞，薄壁细胞中也出现大量皂苷。多糖主要存在于不定根的薄壁细胞当中，MeJA处理后，多糖分布量明显增加。

目录

声明

前言

一．西洋参的生物学特性及药理作用

二. 西洋参组织培养

三．诱导子在次生代谢产物生产中的应用

四．组织化学

五．研究目的与意义

1 材料与方法

1.1 试验材料与方法

2 结果与分析

2.1 西洋参不定根培养

2.2 生物反应器培养

2.3真菌诱导子对不定根中皂苷积累的影响

2.4 诱导子对不定根中多糖积累影响的研究

2.5 西洋参不定根中皂苷及多糖的组织化学定位

3 讨 论

3.1 影响不定根生长因素的研究

3.2 诱导子对皂苷积累的影响

3.3 诱导子对多糖积累影响的研究

3.4 西洋参不定根中皂苷及多糖组织化学定位研究

4 结 论

参考文献

致谢