不同抗性晒烟品种接种TMV后抗氧化酶活性变化及N基因分子标记抗性鉴定

摘要

本研究以25份烟草品种为试材，进行了烟草花叶病毒（TMV）人工接种试验，鉴定25份烟草品种TMV抗性程度，且选择具有代表性的免疫（延晒十号）、抗病（坝林晒烟）、中感（延晒四号）品种为试材，研究了接种前后的保护酶活性变化规律。以吉烟九号DNA为模板，选用一对N基因特异性引物，采用25μL PCR反应体系，对影响 N基因的PCR反应体系的主要因子进行单因素优化试验，用所优化的体系对25个烟草品种进行PCR扩增，并结合25个烟草品种的人工接种抗性鉴定结果，验证体系的稳定性和可靠性。主要研究结果如下：延晒五号、B7、8107等9份材料为TMV免疫品种；坝林晒烟为TMV抗病品种；小马稀、延吉千层塔、建平大兰花烟等6份材料为TMV中抗品种；大马稀、自来红、云烟87等8份材料为TMV中感品种；G140为TMV感病品种。在超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性表现上，随接种时间的推进，三个对照处理的酶活性均逐渐上升，三个接种处理则呈先上升后下降的趋势；接种后6-24d，三个品种接种处理均比对照处理高，增加幅度最大的是延晒十号，最小的是延晒四号；接种后36d，三个接种处理均低于对照，降低幅度由小到大依次为延晒十号、坝林晒烟、延晒四号。晒烟N基因PCR最适反应条件为25μL体系中含20ng/μL模板DNA；0.20μmol/L引物；1.5mmol/L Mg2+；0.20mmol/L dNTPs；1.0 U Taq酶。由分子鉴定和人工鉴定结果可知，凡能扩增出特异条带的品种，其人工抗性鉴定为TMV免疫，由此可见，分子标记抗性鉴定与人工接种鉴定结果完全吻合，说明分子标记鉴定N基因控制的晒烟TMV抗性方法科学可靠，可以作为早期鉴定TMV抗性的有效辅助手段。

目录

声明

第一章 前言

1.1 烟草花叶病毒病症状

1.2 TMV病人工抗病性鉴定的研究现状

1.3 植物体内的抗氧化酶

1.4 抗TMV N基因分子标记

1.5 本文研究的目的和意义

第二章 25个烟草品种对TMV病的人工抗性鉴定

2.1 试验材料与地点

2.2 试验设计

2.3 试验方法

2.4 结果与分析

第三章 不同抗性晒烟品种接种TMV后抗氧化酶活性的变化规律

3.1 试验材料及仪器

3.2 试验设计

3.3 试验方法

3.4 数据分析

3.5 结果与分析

第四章 晒烟抗TMV N基因PCR反应体系优化

4.1 试验材料、试剂、仪器

4.2 体系优化试验设计

4.3 试验方法

4.4 结果与分析

第五章 25个烟草品种N基因分子标记抗性鉴定

5.1 试验材料

5.2 试验方法

5.3 结果与分析

第六章 讨论与结论

6.1 人工接种鉴定晒烟TMV病抗性

6.2 接种TMV后对抗氧化酶活性的影响

6.3 N基因PCR反应体系的优化

6.4 烟草TMV病的人工鉴定与分子鉴定

6.5 结论

参考文献

致谢

附录A（攻读学位期间发表论文目录）

附录B