朝鲜族大酱的品质及对肿瘤细胞生长抑制作用的研究

摘要

朝鲜族大酱作为延边朝鲜族地区的传统美食，不仅美味可口，而且营养丰富，其中还含有多种有利于人体健康的功能性成分，能够起到抗氧化、降血压、降血脂、延缓衰老、抑制肿瘤生长等多种功效。目前，对大豆及大豆的发酵制品的研究很多，但在菌种和发酵天数对朝鲜族大酱的品质影响和朝鲜族大酱对不同肿瘤细胞抑制效果方面的研究还是空白。因此，本实验研究结果可为朝鲜族大酱的发酵工艺和基础研究提供理论指导，并推进朝鲜族大酱向功能性食品方向的发展，为癌症的饮食疗法提供新的思路。
　　目的:
　　1.比较接种不同菌种的朝鲜族大酱的品质，以及不同菌种对朝鲜族大酱中异黄酮含量变化的影响，确定最佳发酵方案。2.接种不同菌种的朝鲜族大酱中抑癌成分的测定。3.测定按最佳发酵方案进行发酵的朝鲜族大酱对不同肿瘤细胞的抑制率。
　　方法:
　　1.通过单一因素实验探讨发酵时间、所接种菌种对朝鲜族大酱中主要成分的影响，进而确定朝鲜族大酱的最佳发酵方案，包括时间以及接种的菌种，发酵后进行品质比较。2.选取最佳发酵方案进行朝鲜族大酱发酵，对发酵后的朝鲜族大酱进行异黄酮含量的测定。3.选取同时接种地衣芽孢杆菌和米曲霉发酵的朝鲜族大酱，选择发酵15天、30天、45天、60天、75天、90天的朝鲜族大酱分别进行体内试验，用发酵90天的朝鲜族大酱配制成不同浓度的大酱溶液，进行肿瘤细胞抑制率的测定，进行体外试验。
　　结果:
　　1.接种了三种不同菌种的朝鲜族大酱，均在发酵90天时异黄酮含量达到最高，分别为0.202％、0.196％、0.230％，且接种了地衣芽孢杆菌和米曲霉的三号坛大酱异黄酮含量最高。
　　2.同时接种地衣芽孢杆菌和米曲霉发酵的朝鲜族大酱在色泽、口感、滋味和综合评价方面评分最高，且发酵90天时异黄酮含量最高，故选择地衣芽孢杆菌和米曲霉接种，发酵90天为最佳发酵条件。
　　3.体外试验:朝鲜族大酱对人正常细胞无毒副作用，对人肾胚Hek-293细胞的抑制效果不明显，各浓度大酱异黄酮抑制率均在20％左右，而对人宫颈癌Hela细胞，人结肠癌HCT-116细胞以及人肝癌HepG2细胞都有显著的抑制作用，抑制率都超过70％，且对肝癌HepG2细胞的抑制效果最好。体内试验:用不同发酵天数的朝鲜族大酱提取物处理的小鼠，平均瘤重均低于空白对照组，且随着发酵时间的延长，平均瘤重逐渐下降，肿瘤抑制率逐渐增加。其中发酵90天的朝鲜族大酱对肿瘤的抑制效果最好，瘤重为2.19±0.61 g，抑制率达到45.0％。说明发酵90天的朝鲜族大酱能明显抑制S-180肉瘤移植Balb/c小鼠肿瘤的生长。
　　结论:
　　同时接种地衣芽孢杆菌和米曲霉的朝鲜族大酱品质最佳，且发酵90天时异黄酮含量达到最高;且在体内和体外对肿瘤细胞均显示出良好的抑制作用。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 大酱概述

1．2 朝鲜族大酱中的主要活性成分——大豆异黄酮

1．3 大豆异黄酮国内外研究现状

1．4 癌症概述

1．5 国内外癌症患病趋势

1．6 大豆异黄酮的抗癌机理

1．7 癌症的预防、治疗现状及展望

第二章 发酵时期及不同菌种对发酵大酱品质的影响

2．1 大酱最佳发酵条件的确定及品质的比较

2．1．1 实验材料、试剂与仪器

2．1．2 实验方法

2．2 结果与讨论

2．2．1 三波长紫外分光光度法金雀异黄素标准曲线

2．2．2 大酱发酵过程中异黄酮含量曲线

2．2．3 朝鲜族大酱发酵结束后各项指标的测定

2．2．4 不同菌种对大酱色度的影响

2．2．5 不同菌种对大酱感官特性的影响

2．3 小结

第三章 发酵大酱对不同癌细胞抑制率的影响

3．1 实验材料、试剂与仪器

3．2 实验方法

3．2．1 大酱粗提取物的制备

3．2．2 体外抗肿瘤试验

3．2．3 体内抗肿瘤试验

3．3 结果与分析

3．3．1 体外抗肿瘤试验

3．3．2 体内抗肿瘤试验

3．4 小结

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢