声明
摘要
中英文对照表
前言
第一部分PTX体外浓度测定方法的建立及载PTXL的制备与表征
2实验方法
3实验结果
4小结
第二章PTX脂质体制备及处方优化
1实验材料与仪器
2实验方法
3实验结果
4小结
第三章PTXL表征及质量评价
1实验材料和仪器
2实验方法
3实验结果
4小结
第二部分PTXL体外抗HKFs作用研究
1实验材料与仪器
1．1实验材料
1．2实验仪器
2实验方法
2．1细胞培养
2．2香豆素6(C6)代替PTX检测细胞药物的摄取情况
2．3 PTXL摄取机制研究
2．4 CCK-8实验检测细胞增殖抑制情况
2．5细胞划痕实验
2．6细胞侵袭实验
2．7 Annexin V-FITC／PI双染法检测PTXL对HKFs凋亡的影响
2．8流式细胞仪检测PTX对HKFs细胞周期分布的影响
2．9统计学处理方法方法
3实验结果
3．1 HKFs对C6L的摄取情况
3．2 HKFs对C6L摄取机制分析
3．3 Blank-L细胞毒性及PTXL对HKFs增殖抑制情况考察
3．4 PTXL对HKFs平面迁移及划痕愈合的影响
3．5 PTX对HKFs细胞侵袭能力影响
3．6 PTXL对HKFs细胞凋亡的影响
3．6 PTXL对HKFs的细胞周期阻滞作用
4小结
第三部分PTXL体内抗瘢痕疙瘩生长的效果评价
1实验材料与仪器
1．1实验材料
1．3实验仪器
2实验动物
3实验方法
3．1溶液配制
3．2裸鼠皮下瘢痕疙瘩模型构建
3．3 PTX对裸鼠瘢痕疙瘩生长的抑制作用
3．4肿瘤和内脏组织的HE染色
3．5 TUNEL法检测瘢痕疙瘩组织凋亡情况
3．7统计学处理方法方法
4实验结果
4．1瘢痕疙瘩裸鼠模型评估
4．2 PTX对瘢痕疙瘩治疗效果评价
4．3裸鼠瘢痕疙瘩和内脏组织的HE染色
4．4 TUNEL染色观察瘢痕疙瘩组织凋亡情况
5小结
第四部分PTX通过PI3K／Akt／GSK3β的活化在瘢痕疙瘩疗中的抗纤维化及抗炎作用
1实验材料与仪器
1．1实验材料
1．2实验仪器
2实验方法
2．1蛋白抽提
2．2 BCA法蛋白定量
2．4 western blot实验检测HKFs中蛋白表达
2．5免疫组织化学染色检测瘢痕疙瘩组织中蛋白表达
2．6统计学处理方法
3实验结果
3．1 HKFs中TNF-α、IL-6和TGF-β的表达
3．2 HKFs及瘢痕疙瘩组织中Akt／GSK3β通路及α-SMA、Collagenl的表达
4小结
第五部分讨论
1结论
2展望
参考文献
致谢
【综述】PI3K／Akt通路及其在瘢痕疙瘩中的作用
附录
