文摘
英文文摘
独创性声明及学位论文版权使用授权书
英文缩写词
第一章文献综述
一、核小体重塑(remodeling)复合物
(一)依赖ATP的重塑复合物(ATP-dependent remodelingcomplexes)
(二)组蛋白修饰酶类重塑复合物
二、组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase，HAT)
(一)组蛋白乙酰转移酶的分类
(二)组蛋白乙酰转移酶及其复合物的功能
三、组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase，HDAC)
(一)组蛋白去乙酰化酶的分类
(二)组蛋白去乙酰化酶的功能
四、HDAC和HAT在癌症发病中的作用及其对癌症治疗的启迪
(一)组蛋白乙酰转移酶(HAT)与癌症
(二)组蛋白去乙酰化酶(HDAC)与癌症
(三)HDAC抑制剂的作用机制、分类及筛选
五、作为转录桥梁和支架的组蛋白乙酰转移酶CBP/p300蛋白家族
(一)基因
(二)蛋白
(三)与CBP/p300相互作用的成分
(四)CBP/p300的乙酰转移酶活性
(五)直接磷酸化对CBP/p300功能的调控
(六)功能
第二章前言
一、本论文的研究背景和立题依据
(一)IL-5简介及研究背景
(二)立题依据
二、本论文的研究内容和意义
第三章材料与方法
一、实验材料
二、实验方法
(一)分子克隆
(二)质粒大量制备的方法
(三)哺乳动物细胞培养
(四)哺乳动物细胞转染及报告基因活性测定
(五)哺乳动物细胞总RNA的提取
(六)逆转录PCR(RT-PCR)
(七)染色质免疫沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation，ChIP)
(八)SDS-PAGE电泳及WesternBlotting
第四章结果与分析
一、重组质粒的构建
(一)IL-5报告基因质粒的构建及鉴定
(二)pcDNA-p300AHAT表达质粒的构建
(三)pcDNA-E1A表达质粒的构建
(四)C/EBP表达质粒(pcDNA3.1-C/EBP)的构建
二、腺病毒E1A癌蛋白抑制IL-5基因启动子活性
(一)腺病毒E1A蛋白抑制PMA和离子霉素刺激的IL-5基因启动子活性
(二)E1A蛋白抑制转录因子C/EBP介导的IL-5基因启动子的激活
三、转录辅因子CBP/p300参与调节IL-5基因启动子活性
(一)过表达CBP/p300蛋白增强了IL-5基因启动子的活性
(二)过表达CBP/P300逆转了E1A对PMA/离子霉素激活的和转录因子C/EBP介导的IL-5基因启动子活性的抑制
四、转录因子C/EBP、NF-AT及c-Fos分别和辅因子CBP协同激活IL-5基因启动子
五、CBP/p300提高内源IL-5 mRNA的表达水平
六、p300的HAT活性对于IL-5基因启动子的活性非常重要
七、组蛋白乙酰转移酶CBP/p300能乙酰化IL-5基因启动子处的组蛋白以及转录因子C/EBPβ
(一)组蛋白乙酰转移酶CBP/p300乙酰化IL-5基因启动子处的组蛋白
(二)乙酰转移酶CBP/p300乙酰化转录因子C/EBPp
结论和创新点
第五章讨论
一、腺病毒癌蛋白E1A通过抑制CBP/p300的功能从而抑制IL-5基因启动子的活性
二、转录因子与转录辅因子协同促进IL-5基因启动子的活性
三、CBP/p300参与IL-5基因表达调控的机制探讨
(一)组蛋白乙酰转移酶CBP/p300将IL-5基因启动子处组蛋白乙酰化
(二)CBP/p300作为桥蛋白将转录因子和基本转录机器联系在一起
(三)CBP/p300通过乙酰化转录因子从而促进IL-5基因的表达
参考文献
致 谢
作者简介
