油茶花药愈伤组织诱导及继代培养研究

摘要

本研究选取12个油茶物种作为对象,通过花药培养技术,进行油茶花药愈伤组织的诱导和继代培养。对不同的油茶物种、供体植株、小孢子发育时期、基本培养基、激素配比、添加物、培养条件、愈伤组织品质、继代次数等花药愈伤组织诱导和继代培养的影响因素进行了研究,找到了油茶花药愈伤组织诱导的有效途径,确定了油茶花药培养的基本试验材料,并对愈伤组织继代以及增殖培养进行了研究。
　　 主要研究结果如下:
　　 (1)12个油茶物种中,小果油茶、普通油茶、短柱油茶、茶陵红花油茶、浙江红花油茶、多齿红花油茶花药培养愈伤组织诱导率较高,在继代培养过程中增殖效果良好,可以确定作为油茶花药培养的基本种质材料开展下一步的试验。
　　 (2)供体植株影响:于幼壮龄油茶植株背阴面、枝条下部以及始花期采摘适合的花蕾进行试验能获得较高的油茶愈伤组织诱导率和继代培养增殖效果。
　　 (3)培养基:MS培养基适合油茶不同物种愈伤组织的诱导；MS、N6培养基能获得较好的愈伤组织继代增殖效果,均附加蔗糖35g/L,琼脂7g/L,pH值5.8。
　　 (4)激素:NAA0.5mg/L+2,4-D0.6mg/L,6-BA0.2mg/L+2,4-D0.5mg/L适合于不同物种白花油茶与红花油茶愈伤组织的诱导；MS培养基附加 NAA0.5mg/L+ZT0.5mg/L,NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L,6-BA1.5mg/L+NAA1.0mg/L,均能获得较好的愈伤组织增殖效果。
　　 (5)活性碳:0.2％～0.8％的活性炭对于油茶愈伤组织继代培养有抑制增殖作用；当激素浓度增加至BA0.4mg/L+NAA1.0mg/L时活性炭对愈伤组织继代培养的增殖能起到较好的防止褐化和促进生长的作用。
　　 (6)培养条件:进行暗培养可以改善愈伤组织继代增殖的状况,以5～10d处理效果较好。
　　 (7)愈伤组织品质:愈伤组织品质不同,其增殖效果有着显著差异。以颜色嫩绿纯正,质地致密稍硬的愈伤组织增殖效果最好。
　　 (8)继代次数的增加对愈伤组织的品质和生长速度有较大的影响,花药愈伤组织继代时间以30±5d为宜。2～6代愈伤组织均增殖良好,6代以后,愈伤组织增殖较差。

目录

文摘

英文文摘

缩略词

1 绪论

1.1 植物花药培养

1.1.1 花药培养的实质及其意义

1.1.2 花药培养原理与发育途径

1.1.3 花药培养的影响因素

1.1.4 植物花药培养研究进展

1.2 油茶概况及组织培养研究

1.2.1 油茶生产现状及其存在的问题

1.2.2 油茶低产原因分析

1.2.3 油茶育种研究进展

1.2.4 油茶组织培养研究

2 研究的目的意义、技术路线、研究方法和内容

2.1 研究的项目依托和目的意义

2.2 技术路线

2.3 主要研究内容

2.4 研究方法

3 材料与方法

3.1 试验材料

3.1.1 植物材料与资源圃概况

3.1.2 试验材料选取

3.2 试验器材及基本技术

3.2.1 主要试验仪器与药品

3.2.2 培养基配制及消毒

3.2.3 试验材料消毒与接种

3.2.4 培养条件

3.3 影响花药愈伤组织诱导率因素的研究

3.3.1 不同物种对愈伤组织诱导的影响

3.3.2 供体植株因素对花药愈伤组织诱导的影响

3.4 油茶花药愈伤组织继代培养

3.4.1 不同物种对愈伤组织继代的影响

3.4.2 愈伤组织继代培养基的选择

3.4.3 激素种类与浓度配比的筛选

3.4.4 活性炭、抗坏血酸对花药愈伤组织诱导的影响

3.4.5 培养条件对愈伤组织继代的影响

3.4.6 愈伤组织品质对愈伤组织继代的影响

4 结果与分析

4.1 花药培养小孢子发育时期的研究

4.2 花药愈伤组织诱导研究

4.2.1 不同物种对愈伤组织诱导的影响

4.2.2 供体植株对花药愈伤组织诱导的影响

4.3 油茶花药愈伤组织继代培养

4.3.1 不同物种对愈伤组织继代的影响

4.3.2 愈伤组织继代培养基的选择

4.3.3 激素种类与浓度配比的筛选

4.3.4 活性炭、抗坏血酸对花药愈伤组织诱导的影响

4.3.5 培养条件对愈伤组织继代的影响

4.3.6 愈伤组织品质对继代的影响

5 结论与讨论

5.1 花药发育时期的选择

5.2 影响花药愈伤组织诱导率的因素

5.2.1 不同物种对愈伤组织诱导的影响

5.2.2 供体植株对花药愈伤组织诱导的影响

5.3 油茶花药愈伤组织继代培养

5.3.1 不同物种对愈伤组织继代的影响

5.3.2 愈伤组织继代培养基的选择

5.3.3 激素种类与浓度配比的筛选

5.3.4 活性炭、抗坏血酸对花药愈伤组织继代的影响

5.3.5 培养条件对愈伤组织继代的影响

5.3.6 愈伤组织品质对继代的影响

5.3.7 继代次数对愈伤组织的影响

6 本论文的创新点

参考文献

附录 A:油茶花药诱导愈伤组织

附录 B:培养基配方

附录 C:攻读学位期间的主要学术成果

致谢