三叶木通籽油提取及生物活性研究

摘要

三叶木通全株均具有药用活性，是一种药用范围很广的植物。三叶木通果实也是一种营养元素丰富的保健水果。目前对三叶木通的研究主要侧重于种质资源调查、遗传序列分析及果皮加工等，而对三叶木通籽油的研究很少。本文对三叶木通籽油提取工艺、理化性质、脂肪酸组成、籽油的活性成分、抗氧化及抗肿瘤细胞增殖活性进行研究分析，结论如下: 1、以三叶木通籽油的提取率(mg/g)为指标，比较索氏提取法、超声波法、超声波辅助水酶法三种方法提取三叶木通籽油，发现索氏提取法效果最佳。在提取温度、提取时间、料液比等单因素试验的基础上，采用正交试验优化索氏提取最佳条件，并对正交试验最佳结果进行了验证。结果表明，索氏提取法的最佳工艺条件是:提取温度40℃，提取时间4h，料液比(g/mL)1∶50，在此最佳条件下，湖北、云南和湖南三叶木通籽油提取得率分别为34.1±3.11，33.3±4.12和31.45±4.23mg/g。 2、对最佳提取条件下的三叶木通籽油进行了理化性质和脂肪酸组成的测定，结果表明，三种三叶木通籽籽油质量较高，色泽均为黄色，淡香味，冷冻试验无沉淀析出。三种籽油的相对密度在0.922～0.931之间，烟点均高于220℃，水分及挥发物含量正常。云南、湖南和湖北籽油的皂化值分别为214.54、210.41和211.39 KOHmg/g。三个产地中，湖北籽油的酸值(0.542 mg KOH/g)和碘值(75.42 g/100 g)最高，云南和湖南依次为0.512 mg KOH/g(75.33 g/100 g)、0.498 mg KOH/g(71.65g/100 g)。湖南和湖北籽油的过氧化值相同，为4.52 mmol/kg，云南籽油为4.13mmol/kg。通过气相检测三叶木通籽油中脂肪酸的组成，三叶木通籽油主要成分棕榈酸、油酸和亚油酸，不饱和脂肪酸含量以湖南产三叶木通最多，达74.68％，其中油酸最高的达48.701％。亚油酸含量最高的为云南产三叶木通，达32.71％。此外，三地籽油中还含有少量的α-亚麻酸。 3.对三种籽油的活性成分进行了分析，多酚含量为53.34±0.14～58.34±0.002 mgGAE/g，黄酮含量为312.37±24.43～739.45±28.84 mg CE/g，类胡萝卜素含量为0.78±0.03～2.16±0.06mg/kg。三地产籽油抗氧化活性以云南产最高，其DPPH，ABTS和FRAP抗氧化活性分别为3.44±0.12，5.55±0.12和0.25±0.02μmol TE/g。细胞实验表明，只有云南产三叶木通籽油对HepG2细胞有抑制作用，浓度为6 mg/mL时抑制率约为20％。

目录

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摘要

1 绪论

1．1 三叶木通概况

1．2 三叶木通研究进展

1．2．1 营养成分

1．2．2 化学成分

1．2．3 生理活性

1．3 常用的植物油脂提取方法

1．3．1 物理压榨法

1．3．2 有机溶剂浸提法

1．3．3 索氏提取法

1．3．4 超声波法

1．3．5 水酶法

1．4 不饱和脂肪酸功效

1．5 研究内容、目的与意义

2 三叶木通籽油提取工艺优化

2．1 材料与设备

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验设备

2．2 实验方法

2．2．1 三叶木通籽预处理

2．2．2 超声波提取法

2．2．3 超声波辅助水酶法

2．2．4 索氏提取法

2．2．5 索氏提取优化工艺研究

2．3 结果与分析

2．3．1 不同提取方法籽油得率的比较

2．3．2 籽油单因素实验分析

2．3．3 籽油的正交实验分析

2．4 本章小结

3 三叶木通籽油理化性质测定与脂肪酸组分分析

3．1 材料与设备

3．1．1 实验材料

3．1．2 实验试剂

3．1．3 实验设备

3．2 实验方法

3．2．1 透明度的测定

3．2．2 气味滋味的测定

3．2．3 色泽的测定

3．2．4 加热试验的测定

3．2．5 烟点的测定

3．2．6 相对密度的测定

3．2．8 水分及挥发物含量的测定

3．2．9 皂化值的测定

3．2．10 酸值的测定

3．2．11 碘值的测定

3．2．12 过氧化值的测定

3．2．13 脂肪酸组成分析

3．3 结果与分析

3．3．1 籽油感官性质

3．3．2 籽油的理化性质

3．3．3 脂肪酸组成分析

3．4 本章小结

4 三叶木通籽油活性成分及其活性研究

4．1 材料与设备

4．1．1 实验材料

4．1．2 实验试剂

4．1．3 实验设备

4．2 实验方法

4．2．1 活性成分的测定

4．2．2 抗氧化活性的测定

4．2．3 抗增殖活性的测定

4．2．4 数据分析

4．3 结果与分析

4．3．1 多酚、黄酮、DPPH、FRAP及ABTS标准曲线

4．3．2 籽油活性成分含量

4．3．3 籽油抗氧化活性结果分析

4．3．4 籽油抗HepG2细胞增殖活性结果分析

4．4 本章小结

5 结论

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

致谢