人胚胎干细胞相关基因hESPRG3及小鼠同源基因mESPRG3的克隆和初步研究

摘要

本文分离和鉴定人胚胎干细胞相关的新基因及其小鼠的同源基因，初步了解该基因及其蛋白质的结构与功能的关系，探索上述基因在胚胎干细胞中的作用。 方法从已获得的在人类未分化的胚胎干细胞和已分化的胚胎干细胞中表达量有明显差异的一个新的ESTCV102247出发，应用生物信息学结合实验的方法克隆了一个胚胎干细胞相关的新基因，并通过生物信息学同源分析的方法获得该基因小鼠同源基因。运用RT-PCR的方法分析表达谱。 构建原核表达载体通过IPTG诱导的方法获得基因特异性表达的蛋白质；构建增强型绿色荧光蛋白真核表达载体对其进行细胞内定位；运用流式细胞术进行细胞周期分析。结果应用生物信息学结合实验方法成功地克隆了一个人胚胎干细胞相关的新基因hESPRG3及其小鼠同源新基因mESPRG3。

目录

文摘

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实验技术路线图

前言

第一章人胚胎干细胞相关基因hESPRG3的克隆和初步研究

(二)hESPRG3基因的克隆和序列分析

1材料和方法

2结果

(二)hESPRG3基因表达谱分析

1材料与方法

2结果

(三)hESPRG3基因原核和真核表达载体的构建

1 材料和方法

2.结果

(四)讨论

第二章mESPRG3基因的克隆与初步功能研究

(一)小鼠同源基因mESPRG3的克隆与序列分

1材料和方法

2.结果(Results)

(二)mESPRG3基因表达谱分析

1材料和方法

2结果

(三)mESPRG3基因的原核表达

1材料和方法

2结果

(三)mESPRG3基因的真核表达和细胞周期分析

1材料和方法

2结果

(四)讨论

小结

参考文献

胚胎干细胞的研究和应用

致谢

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