哮喘PBMC源性IL-10变化及IL-10对哮喘T淋巴细胞源性IL-4、IFN-γ的影响和机制

摘要

目的:探讨支气管哮喘(简称哮喘,asthma)患者外周血单个核细胞(pefipheral blood monouclear cells,PBMC)分泌白细胞介素-10(interleukin.10,IL.10)水平及IL.10对哮喘T淋巴细胞源性白细胞介素-4(interleukin一4,IL一4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-7)影响和可能机制。 方法:选取哮喘患者和健康对照者各10名,抽取外周血15m1分离PBMC,加含10[％]胎牛血清、lOOU/ml青霉素和100U/ml链霉素、万分之三谷氨酰胺及50ug/ml PHA的RPMI-1640培养基(完全培养基)制成PBMC细胞悬液,取2ml PBMC细胞悬液培养(于饱和湿度、37℃、含5[％]CO2培养箱中培养)48小时后用ELISA法测定培养上清液的IL-10浓度(A1组为健康对照者PBMC,A2组为哮喘患者PBMC,两组细胞浓度皆为1x106/m1);同时取另一部分剩余的PBMC细胞悬液贴壁培养2小时分离T淋巴细胞并按如下分组:B1组(健康对照者T淋巴细胞原液组,即于上述RPMI-1640完全培养基中培养),B2组(哮喘患者T淋巴细胞原液组,仍培养于上述RPMI.1640完全培养基),B3组(哮喘患者T淋巴细胞,在B2组基础上加终浓度为lOOng/ml rhIL-10培养),B4组(哮喘患者T淋巴细胞,在B2组基础上加终浓度为1×10<'-6>mol/L地塞米松培养),细胞浓度均为1×10<'6>/ml。将上述分组细胞培养48小时,然后用ELISA法测定培养上清液IL-4、IFN-γ浓度,计算IL4与IFN-γ比值,并用细胞免疫化学染色检测T淋巴细胞内核因子-kb(nuclear factor-kappaB，NF—KB)表达及活化情况。用SPSS 11.5统计软件进行统计分析，测定值采用均数4-标准差(X士S)表示。在方差齐性基础上，α=0.05，双侧PB4组>B1组(均P<0.01)，B2组和B3组比较无差异(>0.05);B4组NF-KB表达率仍高于活化率(P<0.05)；T淋巴细胞NF-KB活性(活化率)、上清液IL-4浓度：B2组>B3组和B4组及B1组(均PB1组(均P<0.05)，而B3组和B4组比较无明显差异(P>0.05)；T淋巴细胞上清液IFN-γ浓度：B1组>B2组(PB3组和B4组(均P<0.05)，B3组和B4组比较无差异(P>0.05)；IL-4／IFN-γ比值：B2组>B3组和B4组>B1组(均P<0.01)，B3组B4组间无显著差异(P>O.05)；哮喘T淋巴细胞NF-KB活性与上清液IL-4浓度及IL-4／IFN-γ比值均呈正相关(r==O.813，r=0.764，均P<0.01)，但与上清液IFN-γ浓度不相关(r==0.332，P>0.05)。 结论： 1．哮喘患者PBMC分泌IL-10水平减低； 2．哮喘患者T淋巴细胞IL-4水平、IL-4／IFN-γ比值明显升高，而IFN-γ则明显降低；哮喘患者T淋巴细胞NF-kB表达及活性明显升高； 3．IL-10和地塞米松均抑制哮喘T淋巴细胞分泌IL-4、改善IL-4／IFN-γ比值，且100ng／ml IL-10与1×10<'6>mol／L地塞米松效应相当；但IL-10和地塞米松也抑制哮喘T淋巴细胞分泌IFN-γ。 4．L-10和地塞米松抑制哮喘T淋巴细胞源性IL-4分泌，改善IL-4／IFN-γ比值可能与抑制NF-kB活性有关，IL-10抑制NF-kB活化，地塞米松抑制NF-kB表达，但地塞米松可能还抑制NF-kB活化；而二者抑制哮喘T淋巴细胞IFN-γ分泌与抑制NF-kB活性无关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：略缩语

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

第一章前言

第二章材料、对象与方法

第三章结果

第四章讨论

第五章结论

第六章参考文献

第七章附录

综述IL-10在支气管哮喘发病中的作用

致谢