Notch信号对SD大鼠视网膜干细胞分化的作用研究

摘要

本研究的目的是:观察Notch信号对体外培养的SD大鼠胚胎视网膜干细胞分化的影响。 方法： 1、从胎龄16天SD大鼠胚胎视网膜神经上皮分离视网膜细胞，用悬浮培养体系培养，进行形态学观察，并用免疫细胞化学法鉴定细胞类型和分析Notch信号的表达。 2、将培养的细胞分为两组，分别加入不同成分的培养基：实验组即Notch信号抑制组，培养基成分为DMEM／F12+N2+5％FBS+lOμM γ-Secretase Inhibitor X+1％DMSO；对照组培养基成分为DMEM／F12+N2+5％FBS+1％DMSO。培养第14天后行免疫细胞化学法鉴定细胞类型和分析Notch信号的表达，比较两组间各种抗原表达的阳性率。 结果： l、原代及传代培养的视网膜干细胞大部分表达Notchl胞内段及其下游转录因子Hesl，少量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mashl：扩增的细胞自发分化后大量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mashl，少量细胞表达Notch l胞内段和Hesl。 2、实验组Notch信号被抑制后，Nestin(神经干细胞标记物)、GFAP(神经胶质细胞标记物)阳性率显著低于对照组，β—Tubulin(神经元标记物)阳性率显著高于对照组，而Recoverin(光感受器细胞标记物)阳性率与对照组差异无显著性。 结论： 1、Notchl信号可能参与了对体外培养的视网膜干细胞分化的抑制。 2、抑制Notch信号可促进体外培养的视网膜干细胞向神经元分化，同时也抑制了神经胶质细胞的分化。

目录

文摘

英文文摘

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前言

第一部分体外培养的SD大鼠胚胎视网膜干细胞中Notch信号的表达

第二部分抑制Notch信号对体外培养的视网膜干细胞分化的影响

结论

参考文献

bHLH转录因子对视网膜细胞命运决定的作用

致谢