中国人CYP1A2基因多态性及其与酶活性和茶碱药动学的相关性研究

摘要

一、目的 本试验拟在发掘中国人CYPlA2新的基因多态性位点的基础上研究基因多态性对酶活性的影响及对茶碱体内代谢的影响，从而为临床合理用药提供依据。 二、方法 1．CYPlA2表型和基因型相关性研究422名健康受试者，空腹口服100 mg咖啡因后，以服药5h后血浆中咖啡因代谢产物1，7．二甲基黄嘌呤与咖啡因比值(17X／137X)来表示CYPlA2酶活性。PCR基因扩增直接测序和PCR-RFLP对422名受试者进行基因分型。分析酶活性和基因型的关系。 2．CYPlA2基因多态性与茶碱药动学相关性研究 在422名受试者中筛选出基因序列已知的37名受试者(36名男性，1名女性)，基因型分别为G-3860A(CYPlA2<'*>1C)、G-3113A、A-164C(CYPlA2<'*>1C)、T5347C。空腹口服200 mg氨茶碱片后采集血样，测定不同时间茶碱血药浓度，计算药动学参数。分析不同基因型受试者茶碱药动学参数的差异。 三、结果 1．在-2467位点附近，鉴定了13个SNP的基因多态性。常见的5个标签性位点-3860A、-3594G、-3113A、-164C和5347T的突变频率分别是0.21、0.15、0.10、0.36和0.14。 2.发现了新的功能性SNP,G-3113A。基因型为-3113A/A的个体酶活性显著低于基因型为-3113G/A(p=0.096)和-3113G/G型(p=0.038.)的酶活性。酶活性分别是-0.45士0.05(LgMR,Mean±SD),-0.32±0.16以及-0.29士0.16。 3.构建了中国人群CYP1A2基因单倍体构型,单倍体13和15的酶活性相差1.92倍(95[％]的可信区间是:1.13～2.71),差异有统计学意义(p=0.016)。携带-3113G/A基因型的单倍体5、8和12酶活性比携带基因型为-3113G/G型的单倍体10、9、15酶活性显著降低。而单倍体5、9、12酶活性比单倍体13酶活性低(p值分别是0.034、0.020和0.037)。 4.本试验联合其它的功能性位点进行研究,未发现文献报道的功能性SNP G-3860A和C-164A对茶碱体内代谢有影响。 5.基因型为-3113G/G、-3113G/A、-3113A/A的个体茶碱AUC<,0-∞>分别是109.2±22.9μg.h.mL<'-1>、113.9±25.6μg.h.mL<'-1>及127.7士23.9μg.h.mL<'-1>,A/A型茶碱体内代谢显著减慢(p<0.001,与G/G型比较)。5347T/T、5347C/C型个体茶碱AUC<,0-t>分别是92.84±13.1 μg.h.mL<'-1>、114.6士23.2μg.h.mL<'-1>,T/T基因型个体茶碱体内代谢加快。 四、结论 1.CYP1A2 G-3113A位点多态性和中国人CYP1A2低酶活性相关。 2．考察CYP1A2基因的功能时需考虑单倍体构型。 3. -3113A／A基因型个体酶活性降低，茶碱体内代谢减慢。 细胞色素P4501A2是肝脏CPY450重要的亚家族，它不但参与多种临床重要的药物的代谢，还与肿瘤的发病和治疗中起着重要的作用。本文对影响CY4501A2活性的诱导剂、抑制剂、受其介导代谢的药物、与疾病的关系及其研究方法等作了介绍。对CYPlA2的进一步研究具有重要的意义。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：本文所用英文缩写词表

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

第一部分CYP1A2基因SNP的发掘与酶活性的相关系性研究 前言

第一部分CYP1A2基因SNP的发掘与酶活性的相关系性研究 1.试验方法

第一部分CYP1A2基因SNP的发掘与酶活性的相关系性研究 2数据分析

第一部分CYP1A2基因SNP的发掘与酶活性的相关系性研究 3结果

第一部分CYP1A2基因SNP的发掘与酶活性的相关系性研究 4讨论

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 前言

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 1.试验方法

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 2.数据处理

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 3.结果

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 4.讨论

第二部分中国人CYP1A2基因多态性和茶碱药动学参数的关系 5.结论

参考文献

附表

综述 细胞色素P4501A2的研究概况

致谢

攻读学位期间主要研究成果