AQ4N在原发性及转移性脑肿瘤微粒体内的代谢研究

摘要

第一部分高效液相色谱方法测定人脑肿瘤微粒体中AQ4N及孵育代谢产物AQ4M，AQ4含量 目的：寻找简便、快捷、高灵敏度的检测人脑肿瘤微粒体中AQ4N及孵育代谢产物AQ4M，AQ4浓度的方法。 方法：通过建立高效液相色谱方法(HPLC)测定人脑肿瘤微粒体内的AQ4N及孵育代谢产物AQ4M，AQ4的含量。 结果：建立了高效液相色谱方法(HPLC)测定人脑肿瘤微粒体孵育体系中AQ4N及孵育代谢产物AQ4M，AQ4的含量，并对该方法进行了方法学验证。其线性范围为：AQ4N 2.245-71.850μg／ml；AQ4M0.366-11.700μg／ml；AQ4 0.740-23.700μg／ml，相关系数r为：AQ4N0.99602；AQ4M 0.99644；AQ4 0.99984，最小检出浓度为AQ4N1.422μg/ml，AQ4M 0.281μg/ml，AQ4 0.712μg/ml。 结论：本方法用于检测人脑肿瘤微粒体孵育体系中AQ4N及代谢产物AQ4M，AQ4的含量，简单、快捷、具有高灵敏度。 第二部分 AQ4N在原发性及转移性脑肿瘤微粒体内的代谢 目的：目前，对肿瘤微粒体内的物质代谢进行的研究还很有限。AQ4N是一种在无氧或低氧状态下(通常存在于实质性肿瘤内)被CYP450代谢转化产生毒性代谢产物的新型抗肿瘤前药。本实验拟通过AQ4N在低氧状态的原发性及转移性脑肿瘤微粒体内的代谢对肿瘤微环境内的药物代谢及相关CYP450酶对代谢的作用进行探讨。 方法：白临床上取得人脑肿瘤组织标本后，以差速离心法制备肿瘤微粒体，以Lowry法进行蛋白定量。在37℃的水浴中建立孵育体系，加入AQ4N和／或CYP3A的抑制剂三乙酰竹桃霉素及CYP1A1／1B1的抑制剂白藜芦醇，通过HPLC方法检测AQ4N在低氧状态下15个脑肿瘤(7个原发性脑肿瘤及8个来源于肺癌的转移性脑肿瘤)微粒体孵育体系内的代谢产物及加入抑制剂后的代谢产物。 结果：在15个脑肿瘤微粒体的孵育体系中都可检测到AQ4N的代谢产物AQ4M及AQ4，尤其是表达CYP3A4的来源于肺癌的转移性脑肿瘤(S20，S21)中，AQ4检出量最高，并且三乙酰竹桃霉素能够明显抑制这些标本内的AQ4N的代谢，白藜芦醇则影响轻微。另外13／15个脑肿瘤标本(除了S20，S21)可以观察到白藜芦醇对微粒体内AQ4N代谢的抑制，但三乙酰竹桃霉素则抑制作用微弱。 结论：AQ4N确实可以在原发性及转移性脑肿瘤微粒体内进行转化，并且与CYP3A，CYP1A1，CYP1B1尤其是CYP3A相关。本实验为前药在肿瘤微粒体内的药物转化提供了一个很好的证据。

目录

文摘

英文文摘

第一部分高效液相色谱方法测定人脑肿瘤微粒体中AQ4N及孵育代谢产物AQ4M，AQ4含量

第二部分AQ4N在原发性及转移性脑肿瘤微粒体内的代谢

参考文献

综述

致谢

攻读学位期间主要研究成果