含黄素氧化酶3基因多态性对盐酸伊托必利药代动力学的影响

摘要

目的：测定三种常见FMO3突变等位基因在中国汉族健康人群中的发生频率，同时在健康男性体内研究FMO3基因多态性对伊托必利药代动力学的影响。 研究方法：采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法对FMO3 E158K、E308G和S147S进行基因型分析。挑选出FMO3 E158K、E308G和S147S均为野生型纯合子(FMO3*W/*W)个体6名、FMO3 E158K、E308G连锁突变型纯合子(FMO3*L/*L)个体6名、FMO3 S147S突变型纯合子个体(FMO3*S/*S)6人共18人，进行临床试验。试验当日早上空腹口服50mg伊托必利，分别于0、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、14、24小时采5mL外周静脉血，采血后半小时内进行离心和分离血浆，运用HPLC-MS法测定血浆中伊托必利及其代谢产物浓度，分析比较不同基因型间伊托必利及其代谢产物各药代动力学参数的差异。 结果：对274名健康志愿者进行了FMO3 S147S、E158K、E308G基因分型，测得FMO3 S147S基因频率为25.9％，E158K基因频率为20.3％，FMO3 E308G基因频率为20.1％。等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡。E158K和E308G基因是连锁的。比较不同基因型间各药代动力学参数，伊托必利和伊托必利N-oxide的Cmax、AUC0-24h、AUC0-∞在组间存在差异且均具有统计学意义。FMO3FMO3*S/*S和FMO3*L/*L组伊托必利Cmax分别是FMO3*W/*W高1.4倍和2.1倍(P<0.05)，伊托必利N-oxide Cmax分别比FMO3*W/*W组低12.5％和34.1％(P<0.05)；FMO3 *S/*S组和FMO3*L/*L组伊托必利AUC0-24h分别比FMO3*W/*W组高1.4倍和2.3倍(P<0.05)，伊托必利N-oxide AUC0-24h分别比FMO3*W/*W组低22.6％和40.5％(P<0.05)；FM03*W/*W组口服清除率(CL/F)、血浆AUC比率(AR0-24)和尿液代谢率(MR0-6h,MR0-12h)均显著高于FM03*S/*S和FMO3*L/*L组，具有统计学差别。FMO3*S/*S组和FMO3*L/*L组其他药代动力学参数与FMO3*W/*W组未见统计学差异(除FMO3*S/*STmax外)。 结论：FMO3 E158K、E308G和S147S均为中国人群中的常见突变，E158K和E308G基因是连锁的，与韩国人群研究报道一致。FMO3S147S、E158K和E308G连锁基因多态性对伊托必利在健康者体内的药代动力学均有着显著的影响。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

第二章材料和方法

2.1实验材料

2.2受试对象

2.3实验方法

2.3.1实验方案

2.3.2 DNA抽提

2.3.3 FMO3基因分型

2.3.4色谱分析

2.3.4药代动力学分析

2.3.6统计分析

第三章实验结果

3.1基因型分析

3.2色谱方法学结果

3.2.1专属性

3.2.2线性范围及最小检出浓度

3.2.3回收率

3.2.4精密度

3.2.5稳定性试验

3.3药代动力学分析

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述 含黄素单氧化酶3（FMO3）结构、功能及其基因多态性的研究进展

致谢

攻读学位期间的主要研究成果