叶酸受体及二氢叶酸还原酶在人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药中的作用

摘要

目的：以耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADR为实验对象，验证FOLRa受体基因及其下游基因二氢叶酸还原酶的表达在乳腺癌细胞多药耐药中的作用。 方法：1.细胞形态学观察和计数了解细胞生长情况；2.采用MTT法检测ADR细胞毒性作用；3.RT-PCR检测细胞叶酸受体、二氢叶酸还原酶mRNA的转录水平；4.MIT检测甲氧苄啶对MCF-7/ADR细胞MDR的逆转作用；5.免疫细胞化学测定细胞P-gp和FOLRa的表达水平。 结果：1.MCF-7/S细胞增殖速度快于MCF-7/ADR细胞；2.MCF-7/ADR细胞对ADR的耐药倍数约为22.5倍；3.MCF-7/S细胞FOLRa mRNA转录水平较MCF-7/ADR细胞高，而MCF-7/ADR细胞二氢叶酸还原酶mRNA转录水平较MCF-7/S细胞高；4.240μmol·L-1及以下浓度的甲氧苄啶对MCF-7/ADR细胞有轻度抑制作用（抑制率<20％），而对MCF-7/ADR细胞的多药耐药无逆转作用；5.免疫细胞化学显示MCF-7/ADR细胞P-gp表达水平较MCF-7/S细胞高，而MCF-7/S细胞FOLRa表达量高于MCF-7/ADR细胞。 结论：1.MCF-7/ADR细胞的FOLRa的mRNA转录水平下调、二氢叶酸还原酶mRNA转录水平升高、细胞P-gp表达增高，说明MCF-7/ADR细胞多药耐药可能与细胞FOLRa的mRNA转录下调、二氢叶酸还原酶mRNA转录升高导致P-gp增加有关；2.甲氧苄啶对MCF-7ADR细胞多药耐药无逆转作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

第一章前 言

第二章材料和方法

2.1实验材料

2.2实验方法

第三章实验结果

3.1 MCF-7/S和MCF-7/ADR细胞的形态学一般特征及生长曲线

3.2 MCF-7/ADR对ADR的耐药倍数的测定

3.3 MCF-7/S和MCF-7/ADR细胞FOLR、DHFR的mRNA的转录水平

3.4甲氧苄啶对MCF-7/ADR细胞的抑制作用

3.5 MCF-7/S和MCF-7/ADR细胞P-gp和FOLRa蛋白的表达

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述：肿瘤多药耐药机制的研究现状及新进展

致 谢

攻读学位期间发表的学术论文